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中药防治柯萨奇B3m病毒性心肌炎实验研究方法探要

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文章内容:?282?辽宁中医杂志2005年第32卷箜4中药防治柯萨奇3病毒心肌炎实验研究方法探要刘芳.闫丽娟.王雪峰(辽宁中医学院附属医院,辽宁沈阳110032)关键词:心肌炎;柯萨奇病毒;中医药防治中分类号:542.21文献标识码:文章编号:1000―1719《200504―0282一2病毒性心肌炎()可发展为扩张型心肌病,严重危害患儿身心健康.而柯萨奇病毒()是导致病毒性心肌炎的主要病原之一…1.随着分子生物学的快速发展,对本病的发病机制研究有了很大突破,但治疗方面仍无大进展.国外主要着手于3感染的疫苗研制【2】,国内研究者采用中医药治疗本病,取得了较好的效果,尤其是近几年由于中药制备工艺的改进,许多中药提取物或中药有效成分抗的研究逐渐增多,笔者从实验研究的角度对中药抗的方法评述如下.1中药抗3心肌炎的体外实验研究方法近几年,随着细胞培养技术,尤其是原代乳鼠心肌,大鼠心肌细胞培养技术的成熟,病毒性心肌炎的体外细胞模型得以建立,中药抗3,肌炎体外实验研究的内容得以深入,主要进行相关研究如下.1.1在传代细胞上的抗3和保护细胞作用的研究传代细胞以其培养条件简单和技术难度小的优点,多年来被广泛应用于药物体外实验的筛选.3易感的细胞株有,,一2等,但目前多被采用的是系.一般根据研究药物抗病毒不同环节分组(即直接灭活组,药物吸附组和治疗组)进行研究,通过观察细胞病变方法和检测细胞活性方法评价药物抗病毒和保护细胞作用.目前常用的检测细胞活性方法有法,0―掺入法等.孙非等[的中药复方制剂体外抗3研究表明:以君药高山红景天和臣药黄芪组成的复方制剂抑制细胞病变的半数有效浓度为250/,对病毒增殖有明显抑制作用,并有量效依赖关系.丁嫒嫒等[】采用―标记法观察天花粉热提取物抗3作用表明:天花粉提取物可作用于病毒的吸附和穿入过程,具有明显抑制病毒致细胞病变作用.1.2在原代细胞上的抗3和保护心肌细胞作用的研究自1960年首创用哺乳类动物大白鼠乳鼠的心脏进行心肌细胞单层培养,并维持其自发节律性搏动4天以来,人们对心肌细胞培养技术不断改良.目前心肌细胞培养已经成为一种十分成熟的实验技术.3体外心肌炎模型主要建立在乳鼠和成年鼠分离培养心肌细胞上,由于它们在体外维持正常心肌细胞所具有的结构,功能及能量代谢等特点,因此将中药作用于体外病毒性心肌炎模型将更有利于深入探讨药物作用环节和作用靶点.目前进行的相关研究包括收稿日期:2004―12―20作者简介:刘芳(1972一),女,四川忠县人,讲师,博士研究生,主要从事中药防治病毒性心肌炎研究.药物对3感染后鼠心肌细胞搏动,细胞活性影响,药物对心肌细胞释放酶的测定及药物对心肌细胞2内流的影响等.杨英珍等5研究发现黄芪可减少3引起大鼠心肌细胞2内流量,对细胞中病毒的复制具有抑制作用,可明显降低3引起的,释放,改善心肌的搏动频率和形态.陈曙霞等6研究表明:苦参能明显减低心肌细胞中病毒滴度,减轻心肌细胞酶的释放,对感染病毒的心肌细胞具有保护作用.2中药抗3心肌炎体内动物实验研究方法2.1动物模型的建立目前,急性病毒性心肌炎的动物模型建立已经是一个较成熟的技术,3敏感的动物有/,1,3等纯种小鼠,造模的方式均采用3病毒悬液腹腔注射.王雪峰等】观察腹腔注射4~6周龄/雄性小鼠3后7天的心肌病理变化,并应用3一克隆测序技术鉴定,以建立3急性心肌炎模型;陈曙霞等8】观察腹腔注

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