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银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究 |
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验大鼠分为正常对照组9只,DN组9只,EGB治疗组9只。治疗组灌胃给予EGB120mg/(kg.d)治疗8wk[5],其余两组灌胃给予生理盐水。所有大鼠常规饲养,不限制饮水,不使用胰岛素。 1.2 观察指标及检测方法 用药第8wk末,用代谢笼收集24h尿液,称重后断头处死大鼠,取出一侧肾脏,去掉包膜称其湿重量,然后取1mm×1mm肾皮质数块,磷酸盐缓冲液冲洗,1.25%戊二醛溶液固定,光电镜检查。血糖用德国保灵曼公司快速血糖仪,24h尿蛋白用MA-4210型尿液分析仪,血尿素用酶偶联速率法,血肌酐用苦味酸法,血及肾匀浆SOD活性用邻苯三酚氧化法,GSH-Px活性测定用硫代巴比妥酸比色法。 1.3 统计学分析 结果以±s表示,显著性差异用组间t检验。
2 结果
2.1 EGB治疗后对实验大鼠肾脏形态学的影响 2.1.1 光镜检查:DN组肾小球体积普遍大于正常对照组,EGB治疗组介于上两组之间,系膜细胞和基质细胞DN组较正常对照组明显增多,EGB治疗组与正常对照组差异不明显。 2.1.2 电镜检查:DN组可见GBM弥漫性增厚,系膜区扩大,上皮细胞足突部分融合(见图1),EGB治疗组轻度系膜增生,基底膜增厚不明显(见图2),与正常对照组相比无明显改变(见图3)。
图1 糖尿病大鼠肾小球基底膜电镜观察(×20000)
图2 EGB治疗组大鼠肾小球基底膜电镜观察(×20000)
图3 正常糖尿病大鼠肾小球西膜区电镜观察(×20000)
2.2 EGB治疗后对实验大鼠血、肾组织、SOD和GSH-Px活性、肾重、肾重/体重的影响 实验结束时,DN组肾重和肾重/体重比值均高于正常对照 组(P<0.01),血、肾组织中SOD和GSH-Px活性明显低于其它两组(P<0.01),治疗组肾重/体重比值明显低于DN组(P<0.05),SOD和GSH-Px活性明显高于DN组(P<0.05),肾重与DN组差异不明显(P>0.05),见表1。
表1 EGB治疗后糖尿病大鼠肾重、肾重/体重、SOD和GSH-Px活性的意义(s)
例数 肾重(g) 肾重/体重 (×10-3) 血浆 肾组织 SOD GSH-Px SOD GSH-Px 正常 对照组 9 0.74±0.08 6.0±1.5 30.93±5.39 49.54±2.59 28.67±3.62 43.67±3.65 DN组 9 1.10±0.12** 10.8±1.7** 15.32±4.73** 29.90±4.34** 11.98±3.74** 24.39±2.56** EGB治 疗组 9 0.90±0.08** 8.3±0.9**△ 25.10±3.95**△ 40.35±5.26**△ 21.56±44.48**△△ 38.76±1.77**△
与正常对照组相比:**P<0.01;与DN组比较:△P<0.05,△△P<0.01 2.3 EGB治疗后对实验大鼠血糖、体重、尿蛋白、尿素(BUN)、肌酐(Cr)的影响 治疗结束时,各组大鼠血糖无明显差异(P>0.05);DN组体重明显低于其它两组(P<0.01);治疗组体重低于对照组,但差别无显著性(P>0.05);DN组尿蛋白排出明显增多(P<0.01);EGB治疗组24h尿蛋白也高于正常对照组,但已明显低于DN组(P<0.01)。DN组和EGB治疗组血BUN和Cr明显高于正常对照组(P<0.001、P<0.05),而前两组间差别无显著性意义,见表2。
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