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三种热感手法对阳虚大鼠肾上腺超微结构影响的实验研究 |
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王倚东
针刺手法是决定针刺治疗效果的关键因素之一，历来研究者甚多。针刺补泻方法繁多，后世学者意见纷纷，很难肯定多种补泻方法疗效的优劣。鉴于此，我们根据多年的临床实践和对多种热补手法的运用体会，深感复式手法的“烧山火”较“捻转”及“提插”温补手法作用效果好。我们以“阳虚”大鼠为研究对象，着重比较“烧山火”手法，“捻转”及“提插”温补手法，三种不同补法对阳虚大鼠肾上腺超微结构的影响，以期从实验的角度比较出三种热感手法的优劣。
1 实验材料
1.1 实验动物：健康Wistar大鼠，雄性，体重(277±18)g，由河南省实验动物中心提供。
1.2 主要试剂：醋酸氢化可的松注射液，中国上海信谊药厂生产，批号970507，规格10 mg/2 ml。0.9%无菌生理盐水，郑州化学制药厂生产，批号96102603。乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)，西安化学制药厂，批号860908。肝素钠注射液，常州化学制药厂，苏卫药准字(93)2239-5号。25%乌拉坦注射液，北京红星制药厂，批号90058。无水乙醇(分析醇)，中国安徽酒精厂，批号961210。
1.3 主要仪器：800型离心沉淀机(上海手术器械十厂)；Ls 8510型液体闪煤油计数器(美国贝克曼公司)；4809型托盘天平(江苏常熟衡器厂)；可调微量移液管(上海精仪厂)；光学显微镜(Olympus，Japan)BH系列；显微镜照相(Olympus，Japan)PM-10-M型。
2 实验方法
2.1 模型制备：健康的Wistar雄性大鼠50只，体重(277±18)g，随机分成5组，即模型组(M)、提插组(A)、捻转组(B)、烧山火组(C)、空白对照(D)。每组10只。“阳虚”动物模型以大剂量醋酸氢化可的松25 mg/(kg*d)肌肉注射［1］，连续12 d；手法组(A，B，C)在造模的同时进行针刺手法治疗，1次/d，共12次，空白对照组(D)在相同的时间注射和造模组相当容积药液的生理盐水。各组实验动物按上述条件处理12 d。第13 d用25%乌拉坦按100 g体重0.4 ml腹腔注射麻醉后［2］，颈部切开，分离颈总动脉以备插管，经颈动脉放血。采血2 ml置于肝素(15 u/ml)干燥试管中［3］。实验结束取血标本后，立即解剖取出肾上腺，固定于10%的福尔马林溶液中。72 h后，切取2 mm厚度组织块，其制作原理、组织切片的程序按脱水、透明石蜡包埋、HE染色法，于光学显微镜下镜检。
2.2 取穴和手法：取穴关元；针具为0.5寸毫针；手法操作依据5版《针灸学》教材；原则为低频率、小角度；时间3 min。
2.2.1 提插：重插轻提，频率50～60次/min。
2.2.2 捻转：角度30～60°，频率50～60次/min。
2.2.3 烧山火：针至皮下为天部，稍下为人部，深部是地部，各部均采取三进一退，微捻转，反复操作。统计学处理采用t检验。
3 结果与分析
3种热感手法对阳虚大鼠温补作用的实验结果及分析如下：
3.1 动物一般状态的观察：造模第12 d后，模型大鼠组虚损状态明显，可出现活动迟缓，神态萎靡，蜷缩，弓背，体毛枯疏，尾部突出，眼睁不开，体重减轻。类似临床上的肾阳虚状态。提插组、捻转组、烧山火组也有类似的表现，但较模型组轻。
3.2 3种热感手法对“阳虚”大鼠肾上腺超微结构影响：各实验组在100倍的光镜下数肾上腺皮质束状带细胞核数，方法是在相同的0.02 mm2面积条件下，于皮质束状带区域内任选视野并数出其细胞核数，其结果如表1所示：
表1 各实验组光镜下肾上腺皮质束状带细胞数量(±s)
组别 肾上
腺数 肾上腺皮质束状带细胞核数
/100.(0.02 mm2)-1 t验 P值
空白对照组(D) 10 30.9±3.54 2.879 ＜0.01*
模型组 (M) 10 26.9±2.60
烧山火组 (C) 10 29.8±2.57 2.509 ＜0.05***
捻转组 (B) 10 29.5±2.81 2.[1] [2] 下一页
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