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绿茶素及壳多糖抗肿瘤实验研究

ch (EAC)腹水癌,由同济医科大学提供。
1.3 药品:绿茶素(TP-91),本院肿瘤室制备,10 mg/ml;壳多糖,湖北大学生命科学院提供,5 mg/ml。
1.4 给药剂量:绿茶素,小鼠用剂量为200 mg/kg;壳多糖,小鼠用剂量为100 mg/kg。
2 方法
  选择接种8 d肿瘤生长旺盛,健康状况良好的荷瘤小鼠,颈锥脱臼处死,用碘酒消毒动物皮肤,无菌条件下抽取腹水瘤悬液,以生理盐水1∶3稀释,给每一健康小鼠的右腹部皮下注射0.2 ml悬液,细胞数4.5×106以形成实体瘤。小鼠接种后24 h随机分组,每组10只,分为对照组,绿茶素组,灌胃0.4 ml给药,壳多糖组,灌胃0.4 ml给药,绿茶素+壳多糖组,各0.2 ml共0.4 ml灌胃给药,1次/d,连续7 d。停药24 h后颈锥脱臼处死小鼠,称体重,解剖剥离瘤块,称瘤重。对照组平均瘤重1 g以上表明肿瘤生长良好,可进行疗效评定。按下列公式计算抑瘤率,取其瘤重平均直径值经



  停药24 h后将活体小鼠眼球取血,抗凝,测淋巴细胞数及酯酶染色方法[2]检测T淋巴细胞阳性百分率。
3 结果
3.1 对荷瘤小鼠抑瘤率比较:治疗组中,绿茶素组抑瘤率平均为40.33%,壳多糖组抑瘤率平均为52.10%,绿茶素+壳多糖组抑瘤率平均为46.73%,经统计处理各治疗组与对照组比较P<0.01,表明对EAC实体瘤均有明显抑制作用。详见表1。

表1 治疗组对荷瘤小鼠抑瘤率的比较(±s)


组别 动物数 瘤重m/g 抑瘤率(%)
对照组 20 1.09±0.31 -
绿茶素组 20 0.65±0.13 40.33
壳多糖组 20 0.49±0.31 52.10
绿茶素+壳多糖 20 0.58±0.31 46.73

  各治疗组与对照组比较P<0.01

3.2 对荷瘤小鼠免疫功能作用比较:实验中观察到各治疗组均能使外周血淋巴细胞总数明显增加和T淋巴细胞阳性率明显增高,经统计处理各治疗组与对照组比较,P<0.01,表明药物对机体免疫功能有良好的促进作用,详见表2,表3。
表2 荷瘤小鼠外周血淋巴细胞数(±s)


组别 动物数 淋巴细胞/109.L-1
对照组 20 2.84±0.61
绿茶素组 20 8.80±2.41
壳多糖组 20 8.30±3.18
绿茶素+壳多糖组 20 8.50±2.35

  各治疗组与对照组比较P<0.01
表3 荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞(±s)


组别 动物数 T淋巴细胞率(%)
对照组 20 4.10±3.35   
绿茶素组 20 24.20±4.56   
壳多糖组 20 14.41±4.37   
绿茶素+壳多糖组 20 22.20±4.75   

  各治疗组与对照组比较P<0.01

4 讨论
  茶为我国传统饮料,也是世界三大饮料之一。茶作为药用,在我国最早的药学著作《神农本草经》中就有记载。近来研究表明,茶中有效成分具有抗菌、利尿、降血脂、防治心血管疾病等医用疗效。流行病学调查表明,产茶区居民的癌死亡率低于非产茶区,有饮茶习惯人群的癌发生率低于不饮茶人群。提示茶对人类特定肿瘤的发生有保护作用。近来我院肿瘤研究室通过化学方法处理,以湖北绿茶为原料,提制出具有多种生物活性的天然、高效、安全的中药绿茶素(TP-91)结晶。提取工艺获得国家专利(专利号:ZL92115082.2)[1]。我们利用其进行抗肿瘤作用实验,研究表明绿茶素对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率及提高外周血淋巴细胞总数及T淋巴细胞阳性率增高疗效明显。绿茶素是一种含黄烷醇类和硒、锗等微量元素的复合物[1]。其抗癌机理是多方面的,包括抗氧化、抗突变。动物实验证明,从茶中提取的茶色素中茶多酚能够抑制C-fos和C-myc等癌基因的过量表达,对抑癌基因Rb则有正调控作用。茶色素中儿茶酚能有效地抑制DNA拓补异构酶的活性,防止DNA单链断裂,从而抑制

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