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人参根和茎叶皂甙对大鼠学习记忆障碍改善作用研究 |
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效地改善东莨菪碱所致的健忘[4]。本次实验中将采用八肢放射状迷路对东莨菪碱所致的大鼠空间记忆进行深入研究和探讨。 1 材料 1.1 动物:Wistar种雄性大鼠,体重210~240 g,实验中为促使动物对诱饵的迫切性,限制食饵,体重控制在正常体重的85%左右,饮水可自由供应。 1.2 药品:人参根和茎叶皂甙由台宝山教授提供。总皂甙用双波长薄层扫描(岛津CS-910)作定量分析。人参根总皂甙中Rb1,Rg1,Re1分别为9.75%,4.86%,8.57%;人参茎叶总皂甙中Rb1,Rg1,Re1分别为1.35%,12.28%,36.48%。 1.3 装置:由有机玻璃制作的八肢放射迷路如图1所示。中央为出发室,直径30 cm。八肢迷路各肢长50 cm,宽12 cm,边缘4 cm高的侧板。实验装置距地面高度为40 cm。 2 方法和结果 2.1 统计处理:实验中所得数据经方差分析后用Mann-Whitney U检验进行统计处理。 2.2 实验方法和步骤
图1 八肢放射迷路示意图
首先对实验大鼠进行适应性训练,抚摸5 min/d,并放在实验装置中央出发室自由行走10 min,有意识引导大鼠至末端食饵盒中觅取诱饵(用鱼粉和淀粉制作的小糖丸)。1周后进行获得性学习记忆训练。即将大鼠放入中央出发室,按一定规律(动物的认知地图)进入8个选择肢将食饵觅取。正确选择:每次试行中大鼠进入未觅食的选择肢获得食饵;错误选择:每次试行中,大鼠进入已觅食的选择肢未获得食饵。最初正确选择数:大鼠最初出现错误选择之前的正确选择数。总错误选择数:8个选择肢的食饵全部觅取后出现的错误选择数。训练1次/d,即八粒食饵全部觅取为一个试行。学习记忆达标基准为8次选择,7次及其以上正确选择连续5 d为达标。一般需训练10~15 d。 2.3 人参根皂甙(Gin-R)对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的影响:Wistar种大鼠60只随机分成5组,以生理盐水为空白对照,东莨菪碱实验前30 min腹腔注射。东莨菪碱(Scopolamine) 0.3 mg/kg腹腔注射能使大鼠八肢放射迷路课题中错误选择数显著增加(图2),并且明显降低初期正确选择数(图3)而人参根皂甙12.5~50 mg/kg于实验前1 h给药后,能显著地改善东莨菪碱所致的大鼠学习记忆障碍。 2.4 人参茎叶皂甙(Gin-LS)对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的影响:分组和给药方法同上。人参茎叶皂甙对东莨菪碱所致健忘的改善作用,随皂甙用量的增加,东莨菪碱所致的大鼠错误选择数显著降低(图4)。同时,对东莨菪碱所致的最初正确选择数的降低也有明显的改善作用(图5)。
图2 人参根皂甙对东莨菪碱所致大鼠放射迷路总错误选择数的影响。n=12,GIN-R为人参根皂甙,Scop为东莨菪碱,统计采用Mann-Whitney U检验。x±SE,**P<0.01为生理盐水组与东莨菪碱组比较; ##P<0.01为人参根皂甙组与东莨菪碱组比较
图3 人参根皂甙对东莨菪碱所致大鼠放射迷路最初正确选择数的影响。n=12,GIN-R为人参根皂甙,Scop为东莨菪碱,统计采用Mann-Wintney U检验。x±SE,**P<0.01为生理盐水组与东莨菪碱组比较;#P<0.05为人参根皂甙组与东莨菪碱组比较
图4 人参茎叶皂甙对东莨菪碱所致大鼠放射迷路总错误选择数的影响。n=12,GIN-LS为人参茎叶皂甙,Scop为东莨菪碱,统计采用Mann-Wintney U检验。x±SE,**P<0.01为生理盐水组与东莨菪碱组比较;#P<0.05,##P<0.01为人参茎叶皂甙组与东莨菪碱组比较
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