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伸筋草不同提取部位抗炎镇痛药理实验研究 |
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目前伸筋草抗炎抗风湿的活性成分仍不明确,严重影响了药物的开发应用与药材质量标准控制。本文采用祛风湿药研究的主要药理试验对伸筋草不同提取部位的药效进行对比研究,确定有效部位,为伸筋草抗炎抗风湿活性成分的
1 材料 1.1 药物:伸筋草,经陈建南老师鉴定为石松科植物石松Lycopodium japanicum Thunb.;氯仿、正丁醇、石油醚等为分析纯;水为去离子水。 1.2 动物:NIH 种小鼠,体重18~22 g;SD系大白鼠,体重为150~180 g,均购自广东省卫生厅医用动物中心。
2 方法与结果 2.1 供试样品的制备:取1 000 g伸筋草药材,加95%乙醇加热回流提取3次,第1和第2次各3 h,第3次为2 h,过滤,合并乙醇液,回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏。加2 000 ml水,使浸膏混悬,加石油醚萃取5次,1 000 ml/次,合并石油醚提取液,回收,得油状物7.50 g;水层加氯仿萃取5次,1 000 ml/次,合并氯仿提取液,回收,烘干,得浸膏9.60 g,加2%吐温-80 500 ml使溶解,作供试品A溶液;水层加正丁醇萃取5次,1 000 ml/次,合并正丁醇提取液,回收,烘干,得浸膏11.00 g,加2%吐温-80 500 ml使溶解,作供试品B溶液;水层挥干,烘干,得浸膏116.0 g,加2%吐温-80 500 ml使溶解,作供试品C溶液。 2.2 最大耐受量:伸筋草3种供试品溶液A、B、C,经急性毒性测试,分别经予NIH种小鼠按0.4 ml/10 g体重ig给药,结果表明:3种供试品的最大耐受量均大于80 g生药/kg体重。
图1 三种供试品对小鼠痛阈值勤的影响
2.3 镇痛药理实验研究 2.3.1 热板法:挑选痛阈值大于10 s、小于30 s反应敏感的健康雌性小白鼠44只,随机分为4组,每组11只,分别ig水、供试品A、B、C各0.2 ml/10 g体重。于ig后30、60、90、120 min分别测定各鼠痛阈值。若小鼠在热板上60 s仍无痛反应,即取出按60 s计。结果见表1和图1,伸筋草3个供试品均有显著对抗热板引起的疼痛反应,其镇痛强度依次为A>B>C,分别与对照组比较P<0.05~0.01。 2.3.2 醋酸扭体法:取小白鼠80只,随机分为4组,每组20只,♀、♂各半,分别ig水、供试品A、B、C各0.2 ml/10 g体重。给药后40 min腹腔注射(ip)0.7%醋酸溶液0.2 ml/只,然后观察并记录小白鼠出现扭体的时间。结果见表2,3种供试品对醋酸引起的化学刺激致痛无明显对抗作用,与对照组比较 P>0.05。
表1 给药前后对小鼠痛阈值的影响(热板法)
组 别 剂量 (g/kg) 动物数 (只) 药前痛阈值 (s) 药后30 min 痛 阈(s) 提高率(%) 水 11 22.18±3.89 22.91±4.41 3.3 供试品A 40 11 23.75±3.65* 26.75±5.45** 12.6 供试品B 40 11 23.67±4.78* 29.08±7.05*** 22.9 供试品C 40 11 22.67±3.49* 24.00±3.07*** 8.7
组 别 药后60 min 药后90 min 药后120 min 痛阈(s) 提高率(%) 痛阈(s) 提高率(%) 痛阈(s) 提高率(%) 水 25.64±4.52 15.6 28.55±4.29 28.8 29.64±2.66 33.6 供试品A 36.83±12.64*** 55.1 42.42±9.16*** 78.6 45.92±9.85*** 93.3 供试品B 33.58±6.89*** 41.9 39.25±8.76*** 65.8 39.83±5.56*** 68.3
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