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不同转染方法对逆转录病毒转染效率影响的研究 |
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并且得到了比较乐观的结论。Cone和Karlsson等人均用逆转录病毒表达载体实现了人珠蛋白基因的正确表达［2］。Otani等［3］用逆转录病毒将IL1Ra基因直接注入兔关节炎模型中，发现软骨基质分解和蛋白多糖合成抑制的情况由于基因转染而有所削弱，且以促进蛋白多糖合成的作用最为显著。张晓玲等［4］也证明了逆转录病毒能介导人IL－1Ra 在关节滑膜细胞中稳定表达，同时芮云峰等［5］也用逆转录病毒介导IL1Ra和IL10联合转染人软骨细胞并获得理想的稳定表达。另外在肿瘤、血液病及其肝脏疾病的治疗中也得到了广泛应用。然而，困扰各位学者的瓶颈之一无疑是病毒转染的低效率问题，作者从病毒类的侵蚀特性出发，分别采用不同的加样方法进行转染，从而寻找突破口。实验发现先加病毒上清，6 h后补充培养液，隔夜培养后弃液，重复先加病毒上清，6 h后补充培养液的加样方法进行转染后，目的基因的表达量明显高于其他转染方法，进而说明了该方法的转染效率最好，为逆转录病毒载体的广泛应用打下理论基础。
【参考文献】
［1］Fredrick MA，Kingston KE.精编分子生物学实验指南［M］.第4版.北京：科学出版社，2006：351354.〖1〗［2］邱丽筠，俞淑文，张芳，等.基因治疗载体的最新研究进展［J］.中华实用医药杂志，2004，4(1)：1218.〖1〗［3］Otani K，Nita I，Macaulay W，et al.Suppression of antigeninduced arthritis in rabbits by ex vivo gene therapy［J］.J Immunol，1996，156(9)：35583562.〖1〗［4］张晓玲，于长隆，毛泽斌，等.逆转录病毒载体PLXRN介导的人IL1Ra 在关节滑膜细胞中的表达［J］.体育科学，2005，25(7)：2124.〖1〗［5］芮云峰，王友，张晓玲，等.白细胞介素1受体拮抗蛋白和白细胞介素10联合基因转染人骨关节炎软骨细胞的研究［J］.中华实验外科杂志，2007，24(11)：14071410.
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