g MDA contents in the serum and hepatic tissue of high dose group and low dose group were more better than the control group (P<0.05).Conclusions Xiaoyu Huatan Liquid has the effect of increasing the SOD activity and reduing MDA contents remarkably.It could remove the free radical and enhance body’s capability of anti-oxidation. 【Key words】 Fatty liver,Alcoholic,MDA,SOD,Therapy of TCM
消瘀化痰饮为治疗非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver diseases,NAFLD)的效方,既往药效学实验已证实消瘀化痰饮具有显著的调节血脂和抗脂肪肝作用[1],但其作用机制尚不十分清楚。研究表明,氧应激与脂质过氧化损伤在NAFLD的形成和发展中具有一定的作用[2,3]。但是,有关中药对NAFLD氧化损伤影响的报道较少,本研究旨在通过观察消瘀化痰饮对NAFLD大鼠肝血清、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响,以进一步探讨其作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物
健康雄性SD大鼠50只, 体质量180~200 g,由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供,动物合格证号:SCXC(鄂)2004-007。
1.2 药物及试剂
消瘀化痰饮,由河北中医肝病医院制剂室制备(课题组监制),实验时,采用0.5%的羧甲基纤维素钠将其配制成所需浓度的混悬液。 东宝甘泰片,通化东宝药业股份有限公司出品,批准文号:H22024764。实验时用0.5%的羧甲基纤维素钠配制成所需浓度的混悬液。SOD试剂盒(批号:20061124)、MDA试剂盒(批号:20061121)均购自南京建成生物工程研究所。
1.3 主要仪器
722型光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),MSE-25型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),分析天平(A&D. Company. Limited. Tokyo.Japan)。
1.4 动物分组与造模
50只健康雄性SD大鼠,饲养于18~22℃明暗各12 h的清洁级动物实验室内,正常喂养1周后,随机分为5组,即正常对照组(简称正常组)、模型对照组(简称模型组)、消瘀化痰饮高剂量组(简称高剂量组)、消瘀化痰饮低剂量组(简称低剂量组)及阳性药(东宝肝泰)对照组(简称对照组)。动物造模参照文献[3]喂饲高脂饲料,高脂饲料由1.5%胆固醇、0.5%胆盐、10%猪油和88%基础饲料制成。除正常组喂饲普通饲料外,其余各组均给予高脂饲料,连续9周。
1.5 给药方法及标本处理
大鼠造模的同时,各组分别给予相应药物灌胃,给药剂量按药理实验方法学计算。消瘀化痰饮高、低剂量组分别按43.34、21.67 g/kg体质量的标准灌服,对照组按0.9 g/kg体质量的标准灌服,正常组和模型组灌服0.9%氯化钠注射液。各组每日灌胃1次,每次用药体积均按1 mL/100 g计算。实验9周末,最后1次给药后禁食12 h麻醉状态下取血,将血样低温离心,分离血清,密封,-20℃冷存待检。取血后迅速剖取肝脏,在肝脏最大叶距边缘0.5 cm处取适量肝组织用冰0.9%氯化钠注射液冲洗,滤纸吸湿后,称取湿重0.3 g左右,加入预冷的0.9%氯化钠注射液,冰水中制成10%匀浆,4℃ 4 000 r/min离心10 min,提取上清液,-20℃冷存待检。
1.6 检测指标及方法
SOD的检测采用黄嘌呤氧化酶法、MDA的检测采用硫代巴比妥酸(TBA)比色分析法,严格按试剂盒说明书检测。
1.7 统计学处理
数据用均数±标准差(±s)表示,采用单因素方差分析和q检验。统计分析用SPSS 12.0软件进行处理,以P<0.05为
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