。按TUNEL试剂盒说明操作标记凋亡细胞，10×20倍光镜下计算5个随机视野凋亡细胞数，凋亡指数（%）=（凋亡细胞数/细胞总数）×100%。1.5 统计学分析 所有数据经SPSS8.0软件处理，两组以上比较采用方差分析和两两比较的q检验。
2 结果
2.1 培养BPH基质细胞特征 显微镜下观察细胞在24h有部分贴壁生长，12日细胞几乎长满需要传代，呈典型的梭形，细胞数目增多形成细胞小结，呈现“峰与谷”的特征。免疫细胞化学染色显示第1、5代Cytokeratin18 + 上皮细胞分别占9.3%和1.7%，α-Actin + 平滑肌细胞分别占35.7%和82.3%，表明经过5～6代后已形成了以平滑肌细胞为主的前列腺基质细胞。
2.2 MTT实验 10 -5 、2×10 -5 、10×10 -5 、50×10 -5 、100×10 -5 （g/L）5种不同浓度前列通淤提取液，抗细胞增殖指数分别为53.52%、56.92%、72.94%、65.53%和50.61%，方差分析显示5种不同浓度前列通淤提取液均具有不同程度的抗增殖作用（44.21%～82.62%），10 -5 、2×10 -5 、100×10 -5 三种浓度之间抗增殖指数差异无显著性，10×10 -5 、50×10 -5 两种浓度之间抗增殖指数差异无显著性，其余各组浓度之间差异均有显著性（见表1）。随着浓度增高抗增殖指数升高，10×10 -5 （g/L）时作用最强，但浓度进一步加大时，抗增殖指数逐渐下降。
表1 前列通淤提取液对前列腺基质平滑肌细胞抗增殖指数 （略）
2.3 TUNEL实验 浓度为10×10 -5g/L的前列通淤提取液，作用前列腺基质平滑肌细胞24、48和72h后凋亡指数分别为1.2%、
1.7%和1.8%，对照组分别为1.3%、1.5%和1.8%，采用方差分析显示各治疗组间差异无显著性。
3 讨论
我国传统中成药治疗前列腺疾病多有良方，但有关细 胞水平作用机制方面的研究报道较少。国外采用植物药治疗前列腺疾病在欧洲最活跃，有的国家多达90%的前列腺增生病人采用植物药治疗。植物药治疗前列腺疾病作用机制主要有以下几个方面的研究报告:直接抑制前列腺的生长;抗雄激素或抗雌激素作用;降低性激素结合球蛋白的含量;改变胆固醇的代谢;干扰前列腺素E的代谢起抗炎作用等 ［3］ 。但有关植物药对前列腺细胞动力学变化的研究则较少见。
MTT法已被广泛应用于检测多种细胞活性、探测药物敏感性的指标，亦
是中药复方药效学研究的有效方法 ［4］ 。本研究发现浓度为10 -5 ～100×10 -5 g/L的中药前列通淤提取液体外作用培养前列腺基质平滑肌细胞，不同浓度均有显著的抗细胞增殖作用。选择最大的抗增殖浓度10×10 -5 g/L未发现有明显的诱导凋亡作用。提示前列通淤提取液中存在抑制前列腺基质平滑肌细胞生长的有效成分。前列通淤胶囊中药方剂中的某些活性成分抑制前列腺基质平滑肌的生长可能是临床治疗前列腺疾病的细胞水平机制。大量研究表明，前列腺基质细胞的生长受多种细胞因子的调节，中药前列通淤提取液调节前列腺基质平滑肌细胞的生长可能是通过调节某种或多种生长因子起作用，亦可能是其活性成分本身即包含多种生长因子，这些都值得深入研究［5］。本实验采用前列通淤
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