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戊型肝炎病毒IgA抗体的研究进展

复感染患者通常也表现为IgG亲和力高。这种情况在孕妇弓型虫感染患者中也有报道。虽然抗体亲和力能用来区分感染时间,特别是亚临床和无黄疸的患者,也可以鉴定抗-HEV IgM阴性的急性感染,但高和低亲和力的区分不得不凭经验,而且不是所有急性感染都是抗-HEV IgG亲和力都低,也有的患者发病早期抗-HEV IgG阳性,而亲和力高,因此抗体亲和力实验只能作为一种验证实验[13]。

  1.4 抗-HEV IgA与HE的关系

  IgA作为免疫球蛋白中一个重要的成员,在黏膜免疫中起着重要的作用。认为可以作为外部屏障作用阻止病毒吸附到黏膜上皮细胞,同时拦截正在感染上皮细胞的病毒,并通过分泌作用将截获的病毒送回到上皮细胞外,已经证实在脊灰病毒、汉坦病毒等感染中,IgA发挥不容忽视的作用[14-15]。EBV-VCA-IgA的检测已被公认是鼻咽癌早期发现、早期诊断、预后监测及大规模普查的敏感、可靠、简便的方法,是提高鼻咽癌早期确诊率的有效途径[16]。IgA抗体被证实在一些病毒性疾病的急性感染期升高,可以作为早期诊断的标志。
在大部分HEV早期感染患者中,可检测到抗-HEV IgM和抗-HEV IgA阳性,但抗-HEV IgA阳性持续时间比抗-HEV IgM长,平均约为(120±23)d,对HEV感染的早期诊断更有意义[8]。早在1993年Chau等[17]就发现血清抗-HEV IgA与IgM同步升高,在恢复期消失,可以作为HEV急性期的感染指标。近年来越来越多的研究证实了这种观点[18-19],IgA作为HEV急性诊断指标的研究越来越受到人们的重视。Takahashi等[20]在猪感染HEV的研究中发现,抗-HEV IgA与病毒血症的相关性远远高于抗-HEV IgM,提示抗-HEV IgA可以指示排毒。而且有些急性感染的患者没有ALT的升高,会有短期的病毒血症,抗-HEV IgG阳性,抗-HEV IgM阴性,却可以检测到抗-HEV IgA阳性,类似情况在脊髓灰质炎病毒、汉坦病毒引起的病例中也有过相关报道[14-15]。有研究表明抗-HEV IgA是HE的急性指标,可代替或辅助现有IgM诊断试剂用于HE诊断,既增加了检测特异性,又能有效减少漏诊[19-21]。

  2 抗-HEV IgA的检测方法

  2.1 蛋白印迹试验检测抗-HEV IgA

  有文献报道用蛋白印迹试验检测抗-HEV IgA[22],这种方法具有灵敏度高、特异性好的特点,可用作HE患者的确证试验。但这种方法操作复杂,耗时较长,影响因素较多,不适合在临床上广泛开展。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗-HEV IgA的方法,具有灵敏、快速、操作简便、费用较低的优点,操作中可用较少的人力快速处理大批量血清标本,检测结果既可直接用肉眼定性判断,也可借助酶标仪精确定量读数,数据重复性好,结果客观可靠,还可借助全自动酶免分析仪使操作过程实现自动化、标准化,适合临床常规检测,是目前HE实验室辅助诊断方法的研究热点。

  2.2 HEV IgA间接法ELISA

  目前文献报道检测抗-HEV IgA多用间接法ELISA,其原理是将用已包被抗原与特异性IgM、IgG、IgA结合,由于患者血清中存在大量的抗-HEV IgG、抗-HEV IgM与抗-HEV IgA竞争结合位点,从而敏感性降低,须通过去除抗-HEV IgG和抗-HEV IgM来提高其敏感性[9]。同时因间接法所包被抗原采用基因1型或2型HEV重组蛋白或合成肽抗原,有研究表明,用第1、2基因型多肽做抗原对检测第3和4基因型感染患者的抗-HEV IgG、抗-HEV IgM和抗-HEV IgA时,其反应不敏感[23]。最近,Bendall等[13]研究发现,以HEV第1、2基因型抗原建立的ELISA诊断试剂在检测英国本土HEV第3基因型感染的患者血清时,急性期HEV抗体检出率可达95%,而半年后检出率仅为12%。Herremans等[22]则发现以HEV第1、2型抗原检测HEV第1型感染,检出率为100%,而检测第3基因型毒株感染时,检出率仅为67%(ELISA)和57%(immunoblot assay)。由于HEV具有多基因型的特征,不同基因型抗原和感染不同基因型HEV患者血清反应时会出现抗原抗体结合的差异,这是导致一些检测方法漏检的主要原因。因此建立高灵敏度和特异性的ELISA检测方法需要使用具有广泛反应性的抗原,尤其是对我国这样存在多基因型HEV感染的国家以及地区进行临床诊断和流行病学筛查[4]。

  3 抗-HEV IgA检测需要解决的问题

  抗-HEV IgA抗体被证实在HE

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