BF的发展成熟和整体生物学行为。这种不均一性可能是BF的“保护效应(insurance effects)”，是细菌生存的重要策略［9］，它使BF无论受到作用于那个代谢环节的抗微生物因子的攻击，都会有一些细菌存活“重建家园”。ISA软件通过TE参数反映了BF结构发展过程中这种不均一性的变化。实验结果显示随着培养时间延长，TE值逐渐增大，说明在一定范围内，伴随BF发展成熟，BF的不均一度愈来愈强，结构越来越复杂，对外界环境变化的抵抗能力也加强。
ISA软件具有较强的分析功能，根据美国Montana州立大学生物膜工程中心的研究积累发现，平面参数中以AP、ADD最有实用价值，这两个参数能直观地描述BF的结构特点及营养供应情况；而结构参数中以TE最有实用价值，可用于不同BF的比较分析。ISA还能提供FD、MDD、AVRL、AHRL、E、H等参数，但是它们与BF发展的潜在关系尚不明确，有待于进一步验证［10］。
本实验还利用CLSM的三维重建功能对部分模型进行了三维重建，得到了PAO1菌株BF的三维立体图像，图像反映BF是一个多样，开放、不均一的结构，与ISA软件分析结果一致。
需要说明，外源基因表达蛋白质，需消耗宿主细胞的营养物、能量及相关酶等，是宿主细胞的额外负组，可导致重组质粒稳定性降低［11］，而BF中底层细菌营养物质最差，可能影响了GFP的充分表达。Leff等［12］亦报道，在低营养条件下的河水中，GFP质粒可能丢失或不表达。
因此，本实验通过体外建立PAO1菌株BF模型，结合CSLM成功实现了对PAO1菌株BF的原位、动态观察，并利用ISA软件对获得的图片堆进行BF空间结构特点的定量分析，比较客观地说明BF形成过程中空间结构变化，为进一步深入认识细菌BF结构及有效控制细菌BF形成提供新的研究思路和技术平台，这对于临床上控制生物材料相关性感染具有重大意义。
【参考文献】
［1］ Bauer T T, Torres A, Ferrer R, et al. Biofilm formation in endotracheal tubes. Association between pneumonia and the persistence of pathogens ［J］. Monaldi Arch Chest Dis,2002,57(1):84～87.
［2］ 单志英，徐海津，施兴启，等. 铜绿假单胞菌最佳电转条件的研究［J］. 遗传学报，2004，31(3)：311～316.
［3］ Beyenal H, Donovan C, Lewandowski Z, et al. Threedimensional biofilm structure quantification ［J］. J Microbiol Methods,2004,59(3):395～413.
［4］ O′Toole G, Kaplan H B, Kolter R. Biofilm formation as microbial development ［J］. Annu Rev Microbiol,2000,54:49～79.
［5］ MaiProchnow A, Evans F, DalisaySaludes D, et al. Biofilm development and cell death in the marine bacterium Pseudoalteromonas tunicata ［J］. Appl Environ Microbiol,2004,70(6):3232～3238.
［6］ Yang X, Beyenal H, Harkin G, et al. Evaluation of biofilm image thresholding methods ［J］. Water Res,2001,35(5):1149～1158.
［7］ Stoodley P, Debeer D, Lewandowski Z. Liquid flow in biofilm systems ［J］. Appl Environ Microbiol,1994,60(8):2711～2716.
［8］ Wood S R, Kirkham J, Marsh P D, et al. Architecture
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