),见图1和表2。
2.3 各组2BS细胞端粒酶活性的比较 年轻组2BS细胞端粒酶活性与对照组无明显变化(P>0.05),用药组2BS细胞端粒酶活性明显高于对照组(P<0.001),见表2。
3 讨论
何首乌主要含有蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物及聚合原花青素等,此外何首乌中还含有大量的卵磷脂和多种微量元素。二苯乙烯苷是何首乌的主要活性成分[4]。何首乌能延长二倍体细胞的生长周期;可明显降低老年小鼠脑和肝组织中丙二醛(MDA)含量,增加脑内单胺类递质水平,增加SOD 活性,还能明显抑制老年小鼠脑和肝组织内单胺氧化酶-B的活性,从而消除自由基对机体的损伤,延缓衰老和疾病的发生;能明显提高老年大鼠的外周淋巴细胞DNA损伤修复能力,调节中枢神经活动,延缓大脑的衰老[5~7]。
图1 RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达(略)
M. DNA marker 1.年轻组 2.用药组 3.对照组
表2 各组2BS细胞c-myc mRNA表达和端粒酶活性比较(略)
注:与对照组比较,a:t=2.157,b:t=0.512,c:t=1.311,P均>0.05;d:t=12.082,P<0.001
有关衰老的自由基学说认为,衰老是自由基(主要是氧自由基) 对细胞成分的有害攻击造成,维持体内适当水平的抗氧化和自由基清除水平可以推迟衰老。正常情况下,体内有多种清除氧自由基的酶,能清除代谢过程中产生的氧自由基,主要有超氧化物歧化酶(SOD),以及过氧化氢酶和过氧化物酶[8]。在本实验中用药组2BS细胞SOD含量高于对照组,表明何首乌药物血清在一定程度上促进细胞SOD的合成(或者是SOD的激活剂),从而使细胞增加抗自由基能力,延缓衰老过程。
研究表明,端粒和端粒酶在细胞复制性衰老中起着重要作用。端粒是真核细胞染色体末端的重复DNA序列,其生物学作用是防止染色体DNA降解、末端融合、非正常重组和染色体的缺失。由于存在“末端复制问题”,随着细胞老化,人体细胞端粒重复序列长度不断缩短,端粒缩短到一定长度,细胞就会停止分裂而走向衰老死亡。但端粒酶能够由自身的RNA提供模板,来维持与染色体稳定至关重要的端粒结构,使细胞具有无限繁殖的能力。如果在正常体细胞中重建端粒酶活性,就可维持细胞的端粒长度,延缓细胞的衰老[9]。端粒酶再激活被认为是细胞逃脱衰老的重要机制。本实验结果数据显示,用药组2BS细胞端粒酶活性明显高于对照组,提示何首乌药物血清通过激活端粒酶活性,维持细胞端粒长度或引起端粒缩短减慢,从而延缓细胞的衰老。
目前对端粒酶的激活途径还不完全清楚,从现有资料看,端粒酶的激活是一个多因子参与的多水平的调节过程,涉及转录水平调控、蛋白质之间的相互作用以及蛋白质的磷酸化。其中myc构成了端粒酶激活途径的核心。研究发现[10],myc激活端粒酶的确是通过上调端粒酶的催化亚单位TERT的mRNA表达水平来实现的。在原代培养的无端粒酶活性的乳腺上皮细胞和成纤维细胞中发现myc基因的表达产物可直接激活端粒酶,其活性可以达到肿瘤细胞中的水平。本实验结果发现,年轻组、用药组和对照组2BS细胞c-myc mRNA表达无明显变化,表明含何首乌血清激活端粒酶活性不是通过c-myc激活途径。
本实验结果证实:含何首乌药物血清对2BS细胞具有抗衰老作用,其机理可能与促进自由基的清除和激活端粒酶活性有关。但其确切机理有待进一步研究。
【参考文献】
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[7] 宋士军,李芳芳,岳华.何首乌的抗衰老作用
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