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灭菌灵消毒剂性能的试验观察 |
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0.5 ml菌悬液加入4.5 ml消毒液（阳性对照为无菌蒸馏水）中，混匀。作用至预定时间，取0.5 ml菌药混合液，加入盛有4.5 ml中和剂溶液（经预试验选出为含1.0％硫代硫酸钠、0.5％吐温80的磷酸盐缓冲液）的试管中。中和作用10 min，取该液0.5 ml作活菌计数，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向菌悬液中加小牛血清。
1.2 破坏HBsAg抗原性试验
试验以直径1.5 cm的不锈钢片为载体，染以2.0 μg纯化HBsAg并经37℃干燥。将HBsAg片浸泡于消毒液中至预定时间，取出，移入含1 ml中和剂溶液（经预试验选出为含1.0％硫代硫酸钠、0.5％吐温80、10％小牛血清的磷酸盐缓冲液）的试管中。中和作用10 min，洗脱片上的HBsAg。取洗脱液，以ELISA法（试剂灵敏度为2 ngml）检测HBsAg抗原性。同时，以消毒液与中和剂作用后的中和产物为阴性对照，以中和产物加HBsAg为阳性对照。结果判断，以试验组OD值（S）与阴性对照OD值（N）的比值（SN）<2.1为HBsAg抗原性破坏。
1.3 稳定性试验
将消毒剂密封于容器中，置54℃水浴中存放二周。于存放前、后，分别取样用碘量法测有效氯含量，计算下降率。
1.4 毒性试验
急性经口毒性试验由浙江医科大学用昆明种小白鼠进行。试验设4个剂量组，每组10只小鼠，雌雄各半。分别按1 kg体重给药10.00 g、4.64 g、2.15 g、1.00 g的剂量，用消毒液灌胃，测LD50值。
1.5 消毒物品表面试验
用消毒液（对照组为蒸馏水）擦拭实验台表面。于消毒前、后，分别用浸有中和剂溶液的无菌棉拭涂抹台面5 cm×5 cm采样。将棉拭头剪入盛有5 ml中和剂的试管中，洗脱棉拭上的细菌并混匀。取洗脱液作活菌计数，计算灭除率与清除率（对照组）。
2 结果
2.1 杀菌效果
试验表明，以该消毒剂含50 mgL有效氯的溶液对大肠杆菌作用15 min，以其100 mgL有效氯溶液对金黄色葡萄球菌作用15 min，以其1000 mgL有效氯溶液对枯草杆菌黑色变种芽胞作用15 min，杀灭率均达100％（表1）。当芽胞悬液中含5％或10％小牛血清时，其1000 mgL有效氯溶液作用20 min的杀灭率为100％（表2）。
表1 灭菌灵消毒剂杀菌效果
有效氯浓度(mg／L) 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%)
2 5 10 15
大肠杆菌
50 99.42 99.82 99.98 100.00
100 99.89 99.99 100.00 100.00
200 99.97 100.00 100.00 100.00
金黄色葡萄球菌
50 96.08 99.42 99.67 99.93
100 98.96 99.94 99.99 100.00
200 99.96 99.99 100.00 100.00
枯草杆菌黑色变种芽胞
500 99.80 99.97 99.99
1000 99.95 99.98 100.00
2000 99.99 100.00 100.00
注: 试验温度为19～21℃。阳性对照组平均菌数，大肠 杆菌为1 310 000 cfuml，金黄色葡萄球菌为 1 610 000cfuml，枯草杆菌黑色变种芽胞为 652 000 cfuml。结果为5次试验平均值。
表2 有机物对灭菌灵消毒剂杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞效果的影响
小牛血清浓度(%) 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%)
5 10 15 20
0 99.95 99.98 100.00 100.00
5 99.94 99.97 99.99 100.00
10 99.50 99.95 99.98 100.00
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