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经肝动脉化疗栓塞后TGF |
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癌的一种方法。细胞凋亡这种独特的细胞死亡方式在肿瘤发生、发展、治 疗中起着重要的作用，它与多种基因的参与有关。本研究旨在探讨TACE后肝癌组织中TGF- β1、TGF-α的表达变化及在肝癌细胞凋亡中的作用。
资料与方法
一、一般资料：1993～1997年间我院经TACE治疗后二期手术切除的原发性肝癌患者36例(T ACE组)，其中男性28例，女性8例，平均年龄(44.5±9.6)岁。同期未经TACE单纯手术切除的 原发性肝癌患者19例(非TACE组)，其中男性15例，女性4例，平均年龄(40.1±7.9)岁。标本 经10%福尔马林液固定，脱水，石蜡包埋，作4 μm连续切片。
二、主要试剂：兔抗人TGF-β1单克隆抗体，小鼠抗人TGF-α单克隆抗体，SABC免疫 组化试剂盒及原位末端标记细胞凋亡试剂盒(ISEL试剂盒)均购自武汉博士德生物工程公司。
三、方法：TGF-β1及TGF-α采用SABC免疫组织化学方法检测，细胞凋亡采用ISEL法 检测。各项指标检测均严格按试剂盒说明书操作。
四、结果判定：切片染色完成后，以同一标本上癌组织旁的正常肝实质细胞为正常组织进 行对比。光学显微镜下在肿瘤区和正常组织区随机选取5个高倍镜视野进行观察。TGF-β 1、TGF-α以细胞浆染为棕黄色为阳性，记数每800～1000个肝细胞中阳性细胞比例，染色 按以下标准分级：阳性细胞无(-)、＜1/3(＋)、1/3～2/3()、＞2/3()。并记录其染色 程度。凋亡细胞以细胞核中出现黄色颗粒为阳性细胞，记数不少于800个细胞中的凋亡细胞 数，并计算凋亡指数。凋亡指数=凋亡细胞数/总观察细胞数×100%。
五、统计分析：所有数据采用SAS软件(V 6.40)进行分析，凋亡指数及TGF-β1、TGF- α蛋白表达阳性率间用χ2检验过程。
结 果
一、TACE组与非TACE组TGF-β1表达情况：TGF-β1表达阳性细胞见于实质细胞内， 间质细胞未见阳性染色。TACE组中31例肝癌标本肝癌组织出现TGF-β1阳性染色，染色较 强，阳性率为86.11%(31/36)。非TAGE组中7例肝癌标本肝癌组织出现TGF-β1，阳性染色 ，阳性率为36.84%(7/19)。两组间肝癌组织TGF-β1表达比较有显著性差异(P＜0. 05)。正常组织细胞染色阳性者少见，二组间比较无显著性差异(P＞0.05)。非TACE组肝 癌组织与正常组织细胞TGF-β1表达比较无显著性差异(P＞0.05)，TACE组肝癌组织 与正常组织细胞TGF-β1表达比较有显著性差异(P＜0.05)。
二、TACE组与非TACE组TGF-α表达情况：TGF-α表达阳性细胞见于实质细胞内，间质细 胞 未见阳性染色。TACE组中13例肝癌标本肝癌组织出现TGF-α阳性染色，阳性率为36.11%(13 /36)。非TACE组中16例肝癌标本肝癌组织出现TGF-α阳性染色，阳性率为84.21%(16/19)。 两组间肝癌组织TGF-α表达比较有显著性差异(P＜0.01)。正常组织细胞染色阳性 者少见，二组间比较无显著性差异(P＞0.01)。肝癌组织与正常组织细胞TGF-α表 达比较有显著性差异(P＜0.01)。
三、TACE组和非TACE组肝癌细胞凋亡情况：光镜下可见凋亡细胞核内散在分布黄染细小颗 粒 。TACE组肝癌细胞凋亡现象多见，常见多个聚集的凋亡细胞；非TACE组肝癌细胞凋亡散在， 少见，多呈单个分布。TACE组肝癌细胞凋亡指数为0.1901；非TACE组肝癌细胞凋亡指数为0. 0088。TACE组肝癌细胞凋亡指数明显高于非TACE组肝癌细胞凋亡指数，差异有显著性意义 (P＜0.01)。
讨 论
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