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一种含氯复方消毒液杀灭微生物效果及腐蚀性检测 |
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1 方法
1.1 悬液定量杀菌试验 试验菌为大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、白色念珠菌(ATCC 10231)、枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372)芽胞。经预试验证明,可用含0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80的PBS作细菌繁殖体和真菌杀灭试验的该液中和剂,用含1.0%硫代硫酸钠、0.5%吐温80的PBS作杀芽胞试验的该液中和剂。试验时,取含1%蛋白胨的菌悬液0.1 ml,加入5.0 ml消毒液(阳性对照为PBS)中,混匀。作用至规定时间,取菌药混和液0.5 ml,加入盛有4.5 ml中和剂的试管中,混匀。中和作用10 min,作活菌计数,计算杀灭率。 观察有机物影响时,向菌悬液中加小牛血清。 1.2 乙型肝炎表面抗原破坏试验 试验采用悬液法。试验时,以含5%小牛血清的PBS将纯化乙型肝炎表面抗原(HBsAg)稀释至浓度为10 μg/ml后,取0.1 ml与0.4 ml消毒液混匀。作用至规定时间,再加入0.5 ml中和剂。中和作用10 min,用ELISA法测OD值。同时设HBsAg阳性与阴性对照,以试验组OD值(S)与阴性对照OD值(N)的比值(S/N)<2.1,为HBsAg抗原性破坏合 格[1] 。 1.3 模拟现场消毒试验 将普通瓷碗灭菌后,在碗内底部5 cm×5 cm范围内染以含1%蛋白胨的大肠杆菌悬液,经37℃烘干。试验时,将消毒液(阳性对照为PBS)加入碗中覆盖染菌区。浸泡至预定时间,倾去碗中溶液,用浸有含中和剂采样液的无菌棉拭涂抹采样。将棉拭头剪入采样液中,洗脱棉拭上菌。取洗脱液作活菌计数,计算杀灭率。 1.4 稳定性试验 将包装完好的消毒液分别置于54±1℃水浴及37±1℃恒温箱内。于存放前、后,分别取样测有效氯含量,计算下降率。 1.5 金属腐蚀试验 将碳钢、铝、铜、不锈钢等金属均制成直径2.4 cm、厚0.1 cm的圆片。试验时,每种金属取3片,将不同金属分别用消毒液浸泡72 h。于浸泡前、后,分别称金属片质量,取3片平均值计算腐蚀速率 (R)[2] 。
2 结果
2.1 杀菌效果 经试验,以次氯酸钠与二氯异氰尿酸钠复方消毒液含有效氯150 mg/L溶液,对大肠杆菌作用2 min,对金黄色葡萄球菌作用5 min,对白色念珠菌作用7 min,杀灭率≥99.95%(表1)。以含有效氯2000 mg/L该液作用40 min,对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率达100%(表2)。芽胞悬液中含25%或50%小牛血清时,需作用80 min才使杀灭率达100%(表3)。
表1 含氯复方消毒液对细菌繁殖体与白色念珠菌的杀灭效果
微生物 阳性对照平均菌数 (cfu/ml) 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%) 2 5 7 10 大肠杆菌 1 575 000 99.96 99.99 100.00 100.00 金黄色葡萄球菌 1 835 000 99.49 99.95 100.00 100.00 白色念珠菌 1 684 000 97.32 99.86 99.97 99.99
注: 试验温度为20±1℃。消毒液含有效氯150 mg/L。结果为5次试验平均值。 表2 含氯复方消毒液对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭效果
有效氯浓度 (mg/L) 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%) 10 20 30 40 2000 99.76 99.96 99.99 100.00 1500 98.03 99.77 99.93 99.99
注: 试验温度为20±1℃。阳性对照平均菌数为1 180 000 cfu/ml。结果为5次试验平均值。 表3 有机物对含氯复方消毒液杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞效果的影响
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