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脊髓缺血损伤模型及行为学的实验研究 |
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发性损伤中具有重要作用［1］。缺血性脊髓病是多种损伤疾患的后遗症，如胸腹主动脉瘤手术治疗就可能发生因脊髓缺血所致的截瘫, 且其发病率高达40％～45％［2，3］。研究脊髓缺血致截瘫的机制具有十分重要的理论价值和临床意义。由此，建立理想的脊髓缺血损伤模型十分必要［3］。笔者制作一种新的家兔脊髓缺血再灌注损伤模型，并从行为学方面进行了初步研究。
材料与方法
1．动物模型与分组：日本大耳白家兔32只,体重(2.25±0.25)kg, 雌雄不拘。随机均分为对照组，缺血30,60,90 min组。以选择性阻断腰动脉制备脊髓缺血损伤模型，具体方法见参考文献［4～6］ 。
2．观察指标与方法：(1)后肢运动功能：家兔致伤后于再灌注1，3，7，14 d时，参照Jacobs等［7］方法结合实际工作体会（以下括号内所述）对各组家兔后肢运动功能进行评级，具体标准如下： 0级，全瘫（针刺无反应）；1级，严重瘫痪，最小的功能性运动（肌肉搐动）；2级，能进行功能性运动（受累肢体可负重），但不能齐足跳动；3级，能齐足跳动，但有共济失调和轻瘫（跛行）；4级，齐足跳动，轻度共济失调和(或)轻瘫（奔跑但不够灵活）；5级，正常。据此以0～3级为截瘫标准，计算出各组家兔的截瘫率。(2)感觉运动功能综合评分：根据Reuter等［8］方法对各组家兔再灌注后1，2，4，8，24，48，72 h脊髓感觉、运动、反射功能进行评分。
3．统计学处理：采用t检验对组内、组间样本进行显著性检验。
结 果
1．兔后肢运动功能观察：再灌注1 d时, 各组家兔的Jacobs分级就显示出较明显的差别。见表1。 其后观察了再灌注14 d期间的截瘫率。结果发现，对照组家兔术后1～14 d无明显瘫痪表现, 截瘫率为8/8; 缺血损伤各组家兔随缺血程度的不同,其后肢表现为不同程度、不同类型的瘫痪。再灌注1 d时, 缺血30，60，90 min组家兔大部分发生截瘫,截瘫率分别为5/8,8/8,8/8；但缺血30 min组有3只家兔后肢功能恢复至5级,1只家兔功能恢复至3级；而在缺血60,90 min组家兔仍然全部处于瘫痪状态。再灌注14 d时，截瘫率分别为8/8,7/8,8/8。
表1 再灌注24 h各组家兔后肢运动功能评级
组别 兔数 Jacobs分级
0 1 2 3 4 5
对照组 8
0
0
0
0
2
6
缺血30 min组 8 2 2 0 1 0 3
缺血60 min组 8 6 0 1 1 0 0
缺血90 min组 8 8 0 0 0 0 0
2．感觉运动功能观察：按Reuter法评分，正常家兔评0 分,全瘫时评11分。结果发现，除对照组家兔再灌注24,48,72 h外,其他各组所有时相点评分值均明显高于伤前正常分值；缺血期间各组评分均为11分。总体而言，再灌注后损伤各组各个时相点的分值均明显高于对照组分值(P<0.05～0.01); 60，90 min组的评分值均明显高于30 min组评分值, 60 min组与90 min组比较, 除90 min组再灌注1 h时的评分值明显高于相应60 min组的评分值外, 其他各个时相点间比较无明显差异 (P>0.05)。见表2。
表2 不同时间各组家兔Reuter评分值(±s)
组别 兔数 缺血后 再灌注时间（h）
1 2 4 8 24 48 72
对照组 8
-
6.5±
0.7
4.3±
0.5
2.7±
0.6
2.3±
0.3
1.2±
0.2
1.2±
0.2
1.2±
0.2
缺血30 min组 8 11.0±0.0
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