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体外循环期间外周血淋巴细胞 肾上腺素能受体的变化 |
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温及中度血液稀释。用Stockert Shiley型人工心肺机和西安产鼓泡式氧和器行CPB。CPB总转流时间为97±18分，主动脉阻断时间为74±12分。分别于麻醉诱导前、CPB前、CPB15分、CPB60分和CPB结束时各取静脉血60ml，测量淋巴细胞β受体数目，异丙肾上腺素刺激的淋巴细胞ＣAMP产量和血浆儿茶酚胺浓度。
受体结合实验 用Boym法分离淋巴细胞，调整细胞浓度为6～8×10６cells／ml，经GimsaWright和Trypan blue染色鉴定，淋巴细胞纯度＞90%，活力＞98%。用放射配基结合法测定淋巴细胞β受体数目〔3〕。
表1 血浆肾上腺素和去甲肾上腺素的变化(16例，±s)
麻醉诱导前 CPB前 CPB15分 CPB60分 CPB结束
肾上腺素(ng/L)
去甲肾上腺素(ng/L) 214±64
680±140 244±78
712±162 682±144
1248±316 542±124
1042±212 560±134
1140±264
与麻醉诱导前比较P＜0.01 **P＜0.001
表2 淋巴细胞β受体和ＣAMP产量的变化(16例，±s)
麻醉诱导前 CPB前 CPB15分 CPB60分 CPB结束
Bmax(fmol/10６cells)
Kd(nmol/L)
CAMP(pmol/10６cells) 59.41±12.26
1.94±0.44
24.38±5.21 57.68±18.47
2.12±0.51
20.94±4.87 54.17±14.32
2.42±0.54
17.12±4.13 38.17±10.24
4.36±0.98
15.48±3.98 37.87±9.78
4.23±1.12
15.28±3.12
与麻醉诱导前比较P＜0.05 P＜0.01 淋巴细胞ＣAMP产量测定 淋巴细胞悬于10mmol/L磷酸缓冲液中(含淋巴细胞5×106cells／ml)，取淋巴细胞悬液500μl，加入1mmol/L异丙肾上腺素10μl，用结合缓冲液将反应体系调至600μl，孵育12分(37℃)，煮沸5分终止反应，离心(3 000r／min，15分)，取上清液100μl用放免分析法测定各样本的ＣAMP含量。
血浆肾上腺素和去甲肾上腺素分析 用高效液相色谱电化学法测定〔4〕。
全部数据以±s表示，用配对t检验及直线相关分析行统计学处理，P＜0.05为差异有显著性。
结果
一、血浆肾上腺素和去甲肾上腺素的变化
CPB15分、CPB60分和CPB结束时血浆肾上腺素和去甲肾上腺素均显著高于麻醉诱导前，见表1。
二、淋巴细胞β受体数目的变化 与麻醉诱导前比较，CPB60分和CPB结束时淋巴细胞β受体数目(Bmax)显著下降，并与血浆儿茶酚胺的变化呈显著负相关(r=-0.86,P＜0.01)；平衡解离常数(Kd)明显升高，提示受体亲和力下降，见表2。
三、淋巴细胞ＣAMP产量变化 CPB15分异丙肾上腺素刺激的淋巴细胞ＣAMP产量明显下降，CPB60分和CPB结束时仍维持在较低水平，见表2。
讨论
儿茶酚胺和β受体对心血管功能有重要的调节作用。目前认为，激动剂必须与β受体结合形成受体配基复合物才能兴奋鸟核苷酸结合蛋白(Gs)，Gs进一步激活腺苷酸环化酶(AC)，AC催化三磷酸腺苷转 化为环磷酸腺苷(ＣAMP)，ＣAMP激活依赖于ＣAMP的蛋白激酶，上一页 [1] [2] [3] 下一页
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