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肾癌细胞c |
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的表达、分布及其临床意义进行了初步探讨，对从分子水平揭示肾癌发生、发展的机制，评价其临床进展及预后有重要作用。
1 材料和方法
1.1 标本
1985～1995年手术切除的肾癌石蜡标本52例，作为实验组。男36例，女16例，年龄20～71岁，平均58岁。其中透明细胞癌31例，颗粒细胞癌4例，混合细胞癌17例。癌旁正常组织14例，作为对照组。
1.2 试剂和仪器
c-myc的抗体、ABC试剂盒、FITC-IgG均为美国Santa Cruz公司产品，流式细胞仪及其计算机分析系统为美国Becton Dickinson公司产品。
1.3 方法
免疫组化：石蜡标本常规脱蜡，入水，微波炉250 W，10 min抗原修复，加入抗体，DAB显色，苏木素复染。以PBS代替一抗做阴性对照。以出现棕黄色颗粒为阳性。
流式细胞技术：标本脱蜡，消化，制成7×106/ml的单细胞悬液。其中一份标本加入荧光素标记的抗体，另一份用RNA酶消化，DNA染色。由计算机根据流式细胞仪所测数据和图形，测出阳性细胞率。
1.4 统计学方法
数据分析采用t检验、卡方检验(均由STATISTICA软件包处理)。
2 结果
2.1 c-myc在正常肾及肾癌组织中的表达(表1)
表1 c-myc表达的阳性率
%
标 本 例数 胞浆
阳性率 胞核
阳性率 总阳
性率
正常肾组织 14
0
14.29
14.29
肾癌组织 52 55.77 21.15 76.92
肾癌组织表达的总阳性率高于正常肾组织，χ2=18.04，P＜0.005
c-myc在正常肾组织分布于胞核，在肾癌组织主要分布于胞浆。流式细胞仪定量测量c-myc蛋白表达的阳性细胞率在肾癌和正常肾组织中分别为65.45%±29.19%和8.59%±3.66%，两者差异有极显著意义(P＜0.005)。
2.2 c-myc表达阳性率与肾癌病理分级和临床分期的关系(表2、3)
表2 c-myc表达与肾癌病理分级的关系
%
分级 例数 胞浆表达 胞核表达 总阳性率
G1 13 15.38
30.77
46.15
G2 28 64.29 17.86 82.14
G3 11 81.82 18.18 100
胞浆表达的阳性率G2、G3高于G1，χ2=9.244，P＜0.005
表3 c-myc表达与肾癌临床分期的关系
%
分级 例数 胞浆表达 胞核表达 总阳性率
T1 8
25.00
62.50
87.50
T2 26 46.14 19.23 65.38
T3 9 77.78 11.11 88.89
T4 9 88.89 0 88.89
总阳性率各期之间无显著性差异(P＞0.05)，胞浆阳性率T3、T4期高于T1、T2期，χ2=8.528，P＜0.001。
3 讨论
3.1 c-myc在肾癌细胞胞浆中表达的意义
c-myc所编码产物为一种核磷酸蛋白，它介导细胞从休止状态转向增殖状态。c-myc蛋白能与DNA结合，参与转录调节，从而促进细胞的增殖和分裂，抑制细胞分化〔1〕。在我们的实验中，肾癌c-myc蛋白表达的阳性率和阳性细胞率均高于正常肾组织(P＜0.005)，阳性率为76.92%，比Lipponen等报道的87%略低〔2〕。表明c-myc超表达与肾癌发生、发展有关。另外我们观察到，c-myc在正常肾组织的表达分布于核区，而在肾癌组织中只有21.15%分布于胞核，其余分布于胞浆(55.77%)。Janice等〔3〕在直肠癌的研究中也发现类似的现象，而且利用免疫电镜观察到c-myc蛋白主要位于多聚核糖体上。我们认为c-myc蛋白在肿瘤细胞胞浆中积聚可能有以下原因：①c-myc的mRNA或蛋白的结构改变，导致其在细胞浆内稳定性增加，上一页 [1] [2] [3] 下一页
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