和记录电极间置一针电极接地(图2)。以细电压单刺激的模式,刺激波形为方波,波宽
图2 油槽及电极的放置0.5ms,延时5.00ms,无叠加,起始刺激电压为1V,逐渐增加刺激强度直到引出最大稳定动作电位。刺激伪迹到动作电位第1个波峰为潜伏期,峰基线值为波幅。每只兔的双侧IAN测量结果取平均值后进行记录。
结 果
在48只接受手术的实验兔中,有3只(B、C、F组各1只)在牵张期发生颌下区脓肿,后消瘦死亡,故被排除后续研究。其余45只均耐受手术并保持健康状态。在整个实验过程中,健康兔的体重损失量都<12%。 实验兔在手术后的前2天内仅对软食感兴趣,精神欠佳。而到第3天,开始习惯牵张器,精神基本恢复到术前状态并开始进食普通干草饲料。牵张结束时,所有兔的下颌均明显前凸。
SNAP检测结果显示,正常未进行干预组(Ⅰ组)IAN波幅为0.45mv,延迟期为1.49ms。牵张结束时、固定期1、2、4周时NGF组的波幅均高于对照组;牵张结束时、固定期1、2、4周时NGF组的潜伏期均低于对照组(表1,图3、4)。
应用SPSS10.0软件包进行student t检验,分析NGF组与对照组之间波幅和潜伏期的差异。P<0.05为有统计学差异。在牵张结束时、固定期1周两组之间的波幅和潜伏期无统计学差异,而固定期2、4周NGF组的波幅和潜伏期均显著高于对照组(P<0.05)。表明,牵张成骨中下齿槽神经在固定期2、4周的神经功能好于对照组。表1 两组波幅及潜伏期(±s)
讨 论
牵张成骨技术已经成为一种治疗下颌骨畸形或缺损的重要方法。NGF是20世纪50年初由Levi.Montalcini在小鼠肉瘤 细胞内发现的第1个神经营养因子,通常称为7sNGF。NGF对中枢和外周神经系统的生物效应是维持和促进交感神经及来自神经嵴的感觉神经细胞的存活、分化、成熟以及发挥功能,是参与损伤神经再生和功能修复的重要因素。有研究认为未成熟的感觉神经含有大量的NGF受体,有NGF依赖性,直接影响到它的发育和成熟。无论是局部注射或全身注射外源性的NGF都能起到防止神经切断术后感觉神经细胞的死亡。尽管成熟的感觉神经已经不及未成熟神经依赖于NGF,但仍然具有NGF受体,而且能够作为靶原型逆向营养因子影响上一级神经元,表明NGF在成熟的感觉神经中依然起到很大的作用[14]。
很多研究已经证实了局部应用NGF修复外周神经(包括IAN)的良好效果。同时Eppley等[15]在应用NGF修复兔下牙槽神经缺损时还发现再生的神经轴突周围有新生骨质生成。研究表明,NGF可能通过如下3种途径促进成骨:(1)诱导感觉和交感神经纤维长入骨痂,感觉和交感神经纤维在正常骨代谢和骨折愈合中发挥重要的作用,丧失这两种神经纤维支配的骨组织会表现为钙化不良或骨质疏松,而NGF正是促进这两种神经纤维发育和再生的主要因子之一[16];(2)直接促进成骨细胞的分化并抑制其凋亡[15];(3)促进局部组织血管生成[17]。但是局部注射存在以下不足之处:局部注射势必要对牵张区造成二次创伤,可能造成局部的物理损伤、炎症、疼痛甚至引起感染等潜在的并发症;局部注射的生长因子代谢快,能暂时形成有效的浓度,但是持续时间不长,虽然缓释载体的应用一定程度上维持了局部注射生长因子的作用时间,但是也存在材料的降解产物反应等诸多问题。全身注射NGF不仅能够避免上述医源性损伤的出现,而且除了直接作用于牵张区外,还可能通过作用于中枢促进外周神经的恢复,在体内维持有效的作用时间。另外,全身注射NGF还有方法简便、不良反应小的优点,而且从心理上更容易被患者接受,可作为一种辅助治疗手段,有广泛的临床应用前景。近几十年来国内外对全身注射NGF的作用机制和临床应用进行了颇多研究,陈燕涛等[18]在对48例周围神经损伤患者的治疗中发现,全身应用NGF对周围神经损伤的恢复有显著的促进作用,同时患者疼痛和乏力症状的改善要明显优于对照组。韩汝政等[19]用NGF治疗颅神经损伤70例(肌内注射NGF)与对照组(常规支持疗法)相比,痊愈率、有效率均高于对照组,并能显著缩短病程,早期应用更佳。张素爱等[20]全身应用NGF对98例面神经炎的患者进行治疗,结果显示NGF对面神经功能的恢复在早期即具有促进作用,且随疗程延长,疗效进一步增加,NGF配合常规治疗明显缩短面神经炎病程,改善预后,并具有不良反应少等优点。Santos等[21]在全身应用NGF对大鼠烧伤的研究中,证实NGF不仅能防止外周神经元的死亡而且还能降低血管通透性和血液黏稠度。综上所述,全身应用NGF对中枢神经、外周神经、运动神经或是感觉神经损伤的修复都
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