黏冻状出血改变，腹腔有中等量浅红色腹水；术后6 h：胰腺轮廓不清，广泛出血，可见散在分布的暗红色点灶状坏死；腹腔可见多量暗红色腹水；肠系膜、大网膜上散在皂化斑。术后12 h：胰腺轮廓消失，可见广泛分布的暗红色出血坏死灶；腹腔可见大量血性腹水，胰腺、胰周及肠系膜、大网膜上有较多皂化斑(见图2)。术后24 h：胰腺组织广泛淤血坏死，可见囊肿，腹腔内充满血性腹水、大量皂化斑，并可见不同程度的胃肠胀气。对照组术后各时间点胰腺组织呈淡粉红色，均匀一致，光泽度好，未见明显腹水及皂化斑。
2.3 胰腺组织镜下病理学改变
SAP组：胰腺组织水肿明显，小叶间隙增大，其间充斥大量淡红色渗出物，腺泡细胞肿胀，部分腺泡呈孤岛状；可见坏死灶，坏死区内腺泡结构紊乱，腺泡细胞结构消失，胞核发生凝固、碎裂、溶解，胞膜破裂，最后呈均一红染状；血管及腺泡细胞周围散在炎症细胞（包括单核巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞）以及红细胞；间质内可见坏死的脂肪细胞轮廓，微血管破裂，其周围大量红细胞、白细胞溢出。上述病变严重程度随造模后时间延长而加重（见图3）。对照组：除胰腺腺泡细胞水肿外，小叶结构清晰，未见明显出血坏死，偶见间质内炎症细胞浸润。
2.4 两组大鼠肝、肾、心功能指标变化
各时点，模型组血清谷丙转氨酶、尿素氮、心肌型肌酸激酶同工酶检测结果均显著高于对照组（P<0.05），且各项数值呈一稳定的动态变化（见表2）。
3 讨论
Aho等[2]于1980年首创胆胰管穿刺注射法，是目前运用较为广泛的一种模型，该模型的致模因素与临床相似，模拟胰管梗阻、胆汁反流等病因造成急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）[3]。实验过程中，通过改变注射速度、注射持续时间、药物浓度可以产生轻重不同的AP模型，能较好地控制AP病变程度，也适合评价药物的疗效。但该模型制作过程中，需切开十二指肠外侧壁，并用注射针穿刺经过十二指肠内侧壁至胆胰管进行模型诱导，上述操作易引起十二指肠内侧壁胰头缘血管的损伤而大出血，模型诱导后胆胰管内牛磺胆酸钠易经胆胰管穿刺“假道”溢出而影响模型制作的成功率和稳定性。同时，由于大鼠肠壁薄，血供丰富，切开时易造成肠壁损伤，缝合时又易形成狭窄，人为地引起高位机械性肠梗阻；加之肠壁出血及胰腺炎本身大量的液体渗出，大鼠可因有效循环血容量不足而早期死亡[4]，使之病理生理过程与研究目的不符。
为弥补Aho法的上述缺陷，我们通过总结前人制作SAP大鼠模型及自身实践的经验，在本实验中采用了一种新的胆胰管穿刺注射法制作SAP大鼠模型。我们认为运用该方法制备模型具有以下几个方面特点：①采用5号皮试针头在肠壁无血管区戳一小孔，与切开肠壁相比，既简化了操作又极大地减少了对肠壁的损伤。②十二指肠乳头是大鼠胆胰管汇合部下端的生理开口，采用钝头5号皮试针经此处穿刺，可以减少穿刺时对乳头及其周围肠壁组织造成的损伤，同时避免了因损伤胰头缘血管而引起的大出血，并且还避免了穿刺“假道”所引起的漏胆现象，从而提高了模型制备的成功率和稳定性。③由于大鼠的多条胰管在不同水平开口于胆胰管，且主胰管距乳头开口又较近，因此针头不宜置入过深，以免注药时分布不均，造成病变不均匀。④钝头5号皮试针细而光滑的特质确保了以最小的创伤使其达到成功插入胆胰管，但这一特质也造成了针和管之间留存有一定的空隙，为此我们用两枚显微血管夹夹闭胆胰管穿刺针处，从而在防止牛磺胆酸钠返流入肠道的同时又起到了固定针头的作用，并可简化操作，缩短手术时间。⑤由于牛磺胆酸钠注射模型的死亡率与药物注射压力有关，我们在实验中调整药物的注射速度至0.05 ml/min，以降低早期的死亡率。最后，肠壁穿刺孔处行浆肌层荷包缝合，避免了术后胆漏、肠漏的发生。⑥在熟悉大鼠十二指肠乳头解剖的基础上，并按照本实验的穿刺操作方法，可大大提高胆胰管穿刺的成功率，我们在实验中无一例因穿刺失误而导致模型制作失败，并且熟练掌握操作之后，大鼠模型制备时间可控制在15 min左右，减轻了创伤对实验数据的干扰。⑦各观察指标显示该法制备的模型符合重症急性胰腺炎血清淀粉酶升高、大量腹水、胰腺组织充血水肿、出血坏死炎性细胞浸润同时伴有多器管功能损伤的临床特征，而且腹水量、胰腺组织病理评分、血清生化指标呈一稳定的动态变化表明该模型具有可重复性和稳定性。模型组24 h死亡率为16.67％，其余各组均为0，说明该模型早期具有较长的存活时间。
总之，运用这种新的胆胰管穿刺注射法制作SAP大鼠模型具有取材方便，操作简单、快捷，诱导成功率高，病变符合临床特征，早
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