r nucleolus， large nucleoplasm-ratio， small mitochondria， and little endoplast. In initial stage of damaged liver， OVCs and the expression of ICAM-1 mostly distributed around Hering duct， and then gradually increased and expanded toward hepatic lobule， shown by staining paraffin sections with HE， immunochemistry and transmission electromicroscrope. Immunocytochemistry indicated that ICAM-1 expression on OVCs was positive. Conclusion The expression of ICAM-1 is in accord with distribution of hepatic oval cells， and ICAM-1 is likely to guide OVCs directional migration in the course of the occurrence and development of liver cirrhosis and HCC.
Key words intercellular adhesion molecule-1； hepatic oval cells； migration 细胞间黏附分子－1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）可表达于多种细胞，分布广泛。现有研究证明[1]，ICAM-1与原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）等许多疾病有关，但其影响机制目前还未有确切结论。方驰华等[2]研究证明药物诱导大鼠肝损伤至肝癌过程中，肝组织中卵圆细胞(oval cells，OVCs)在肝汇管区增生，并逐渐向肝小叶迁移，OVCs在肝硬化和HCC的发生、发展过程中起着重要作用。我们已有研究表明，损伤肝组织OVCs表达ICAM-1[3]，设想，OVCs在肝硬化和HCC的发生、发展过程中向肝小叶的迁移是否与ICAM－1有关？为此，我们通过本实验探讨ICAM-1及其对大鼠OVCs在损伤肝组织中迁移的介导作用。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验对象 Wistar大鼠64只，雌雄不限，体质量（100±10）g，饲养于南方医科大学动物研究所，常规饲养1周后，饲喂0.06% DAB饲料，正常饮水。
1.1.2 试剂 3 -甲基-4-二甲基偶氮苯（3 -Me-DAB）购于日本东京化成株式会社；Percoll分离液购自Pharmacia公司；兔抗鼠ICAM-1、即用型SABC试剂盒及DAB显色剂购自武汉博士德生物工程有限公司；Ⅳ型胶原酶购于Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 肝组织标本的采集 Wistar大鼠0.06% DAB饲料饲喂后分别于第2，4，6，8，10，12周取大小约0.5 cm×0.5 cm×0.2 cm肝组织标本，于4%甲醛固定，制备石蜡切片，常规HE染色，并行ICAM-1免疫组化检测。同时，在第4，6，8，10周取肝组织标本时另取1 mm3大小的肝组织标本，于2%戊二醛固定，待做超薄切片，透射电镜观察OVCs与肝星状细胞及肝纤维的生长情况。
1.2.2 肝卵圆细胞的分离 参照薛玲等[4]的方法，并加以改进。Wistar大鼠饲喂0.06% DAB饲料4周后，25 mg/kg体质量戊巴比妥钠腹腔麻醉，备皮，3%碘酊和75%乙醇消毒，无菌操作下开腹，门静脉切开插管，25 ml/min灌注D-Hanks液至肝表面淡黄除去肝组织里的血液，然后灌注0.06% Ⅳ型胶原酶至肝组织黄色糜状，将整块肝组织移入烧杯捣碎，于震荡箱37
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