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白藜芦醇对大鼠脑创伤后伤区脑组织神经细胞凋亡的影响

保护作用成为研究的热点,深入研究白Res的作用和机制具有重要的临床意义。

  由于Bax蛋白与Bcl2蛋白的比值决定细胞受刺激后是凋亡还是存活:Bax蛋白占优时细胞凋亡,Bcl2蛋白占优时则细胞存活。Res对Bcl2和Bax的不同作用导致受损脑细胞的转归。本实验结果证实在颅脑伤后Bax蛋白水平升高,即凋亡促进因子上调,而Res抑制凋亡促进因子Bax的表达,增强Bcl2蛋白表达,从而抑制脑创伤后的神经细胞凋亡,减轻神经病理损害,具有神经保护作用。对脊髓损伤治疗作用的实验研究[9]已发现,Res可以通过促进Bcl2表达、抑制Bax表达的方式保护脊髓,这种能够增强抑制凋亡因子Bcl2的表达并减弱促凋亡因子Bax表达的作用将会给临床药物治疗脊髓损伤带来新的希望。还有实验证明Res对脑缺血具有保护作用,可能是通过抑制细胞凋亡和抑制MMP9来实现[10];另外黄艳等[11]研究证实由于Res具有较强的抗氧化活性,对DNA损伤具有保护作用,能对帕金森病患者黑质细胞凋亡起拮抗作用。

  实验研究还发现,TUNEL、Bc12和Bax均在邻近区表达,而不是在损伤区,考虑可能损伤区神经细胞已死亡,无反应能力。Bcl2蛋白在脑损伤后早期即有表达,24小时开始较高表达,48小时后持续升高,该阳性细胞形态正常且结构完整,这表明Bcl2蛋白在损伤较轻的细胞中较高表达;Bax蛋白在损伤后早期也有表达,48小时表达明显,72小时表达下降,细胞有变形。作者推测Bc12蛋白在损伤早期尚有活力的细胞中高表达,从而抑制细胞凋亡;而Bax蛋白则在注定要死亡的细胞中高表达;Bc12蛋白可以防止或减少损伤导致的神经细胞凋亡,但其作用有限,若不能挽救受损细胞,则会启动Bax基因表达,进而促进细胞凋亡。本实验显示Res可明显上调Bc12蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,这将有助于进一步研究Res在中枢神经损伤方面的作用机制。

  本实验研究结果显示治疗组大鼠受到自由落体伤后经Res腹腔注射治疗,TUNEL阳性细胞数与对照组相比较,存在显著差异,有统计学意义(P<0.05)。表明Res可以减少颅脑损伤后神经细胞的凋亡,有助于神经细胞的修复和功能的恢复。同时,治疗组大鼠Bcl2阳性细胞数相对于对照组增多,有统计学差异(P<0.05),治疗组Bax表达明显低于对照组(P<0.05),提示Res在颅脑损伤后对神经细胞的保护作用可能与Bax的表达下调有关。其中有可能通过抑制Bax的表达,使促凋亡作用减弱,重新调整了Bcl2和Bax之间的平衡,减少了神经细胞的凋亡,起到保护脑组织的作用。细胞凋亡的影响因素很多,而作者研究时间较短,观察时间点还不够多,对Res影响神经细胞凋亡的详细机制还需进行更多方面的研究。

  【参考文献】

  [1]Lossi L,Merighi A.Invivo cellular and molecular mechanisms of neural apoptosis in the mammalian CNS[J].Pro Neurobiol,2003,69(2):287-312.

  [2]Feeney DM,Boyeson MG,linn RT,et al.Responses to cortical injury: I.Methodology and local effects of contusions in the rat[J].Brain Res,1981,21(1):67-71.

  [3]Nathoo N,Narotam PK,Agrawal OK,et al.Influence of apoptosis on neurological outcome following traumatic cerebral contusion[J].J Neurotrauma,2004,101(2):233-240.

  [4]Lee BH,Lee KH,Kim UJ,et al.Injury in the spinal cord may produce cell death in the brain[J].Brain Res,2004,1020(1-2):37-44.

  [5]Clark RS,Kochanek RM,Watkins SC,et al.Caspase3 mediated neuronal death after traumatic brain injury in rats[J].J Neurochem,2000,74(4):740-753.

  [6]Jang

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