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原浆型星形胶质细胞调控神经干细胞定向分化的优化比例筛选

得到的神经元比例最高,而3:1组、1:1组、1:2组分化得到的神经元比例均明显低于2:1组。这可能是在2:1条件下PAS细胞培养液所提供的营养成分及生物活性分子的量最有利于NSC向神经元的分化,3:1条件下可能是由于NSC数量相对过多而PAS相对较少,使其能够分泌产生的NGF、BDNF、TGFβ等利于NSC向神经元分化的细胞因子相对不足而使这一分化过程受到了一定程度的抑制,在此情况下更利于NSC向胶质细胞方向的分化[5-7]。而1:1组、1:2组表现为神经元分化比例的递减趋势,说明细胞在共培养条件下可能存在竞争性生长抑制,特别是PAS生长代谢旺盛会大量消耗培养液中的营养成分,同时会产生更多的代谢产物,成为NSC增殖分化的不利因素,虽然PAS分泌促进NSC向神经元分化的细胞因子也会增加,但不足以完全抵消不利因素的影响,而且高比例的PAS分泌产生的CNTF、EGF以及高浓度的bFGF都促进了NSC向胶质细胞的分化,导致神经元分化比例降低。

  NSC与PAS以2:1共培养条件下,PAS分泌产生的神经营养因子及细胞生长因子的有效剂量促进了NSC向神经元方向的分化,而向胶质细胞的分化途径受到了一定程度的抑制,使神经元的分化比例达到了65%。该结果和以往单一因子以及AS诱导NSC分化的国内外相关研究相比[7],神经元分化比例较高,且本研究所采用的细胞调控方式更接近于在体的细胞生存状态。此外,PAS来自中枢更适应脊髓组织的微环境,它所诱导的脊髓源性NSC分化的神经元能更好地满足损伤脊髓的修复要求。这种细胞联合移植可能会对SCI的结构和功能修复产生积极作用。

  【参考文献】

  [1]曾琳,李民,刘媛,等.原浆型和纤维型星形胶质细胞调控神经干细胞定向分化的比较研究[J].创伤外科杂志,2007,9(2):160-162.

  [2]刘媛,龙在云,曾琳,等.不同培养条件对神经干细胞定向分化的影响[J].中国临床康复,2003,7(31):4228-4229.

  [3]Sugawara T,Lewen A,Noshita N,et al.Effects of global ischemia duration on neuronal,astroglial, oligdendroglial,and microglial reactions in the vulnerable hippocamoal CAI subregion in rats[J].Neurotrauma,2002,19(1):85-92.

  [4]Miyazaki H,Nagashinan K,Okuma Y,et al.Expression of glial cell line derived neurotrophic factor induced by transient forebrain ischemia in rats[J].Brain Res,2001,922(2):165-173.

  [5]Rossella G,Stefano AG,Pagano AG,et al.Regulation of neural differentiation in human CNS stem cell progeny leukemia inhibitor factor[J].Dev Neurosci,2000,22(1):86-95.

  [6]Setoguchi T,Kondo T.Nuclear export of OLIG2 in neural stem cells is essential for ciliary neurotrophic factorinduced astrocyte differentiation[J].J Cell Biol,2004,166(7):963-968.

  [7]Sun Y,Shi J,Lu PH.Neurotrophic factors and neural stem cells[J].Prog Physiol Sci,2002,33(4):313-316.

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