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近交系大鼠肝移植急性排斥模型的建立及排斥反应观察

肝内残留积血,二为检测袖套是否通畅。以上措施可确保我们获取一个优质的供肝。

  3.2.2 增强手术耐受力 近交系大鼠对麻醉、低温、失血及手术的耐受性较差。麻醉后大鼠体温下降明显,尤其在无肝期和新肝期。受体术中出血总量超过2 ml,术后极难存活。为此,手术应在恒温环境下进行,术中采用温盐水纱布包裹肠管以保温和减少液体丢失。我们采取供肝植入后温水冲洗腹腔、术后灯照保暖等措施,以减少低体温导致的凝血功能异常等不良后果。此外,在受体肝切除前我们经PV注射温生理盐水,此举可有效增加血容量,增加受体对出血的耐受性,有效防止了大鼠死亡。

  3.2.3 缩短受体无肝期 无肝期的长短对ROLT的成功至关重要[8]。我们认为良好的暴露、默契的配合、熟练的吻合和套管技术是缩短无肝期的有力保障。我们采用自制拉钩拉开肋弓、将剑突向头侧牵引及背部垫腰枕等措施得到了良好的暴露。SVC吻合采用单线连续外翻缝合法,此法具有速度快、效果好等优点,能有效地缩短无肝期。PV及IVC重建的关键是避免血管扭转,插入套管尽量一次成功。改良技术可以缩短无肝期[9],笔者通过技术改进,无肝期多可控制在11 min 左右,有效地提高了手术成功率。

  综上所述,我们采用改良“二袖套法”成功建立了近交系大鼠肝移植急性排斥模型。该模型重复性好,易于标准化,将会在肝脏移植免疫的研究中发挥重要作用。

  【参考文献】

  [1] Suzuki A, Kudoh S, Mori K, et al. Expression of nitric oxide and inducible nitric oxide synthase in acute renal allograft rejection in the rat [J]. Int J Urol, 2004, 11(10): 837-844.

  [2] 朱 瑾, 董家鸿, 李晓武, 等. 大鼠冷保存供肝肝移植模型的建立及评价[J]. 第三军医大学学报, 2006, 28(23): 2330-2332.

  [3] Chimalakonda AP, Montgomery DL, Weidanz JA, et al. Attenuation of acute rejection in a rat liver transplantation model by a liver-targeted dextran prodrug of methylprednisolone [J]. Transplantation,2006, 81(5): 678-685.

  [4] Yamamoto S, Okuda T, Yamasaki K, et al. FK778 and FK506 combination therapy to control acute rejection after rat liver allotransplantation [J].Transplantation,2004,78(11):1618-1625.

  [5] Nagasaki K, Obara H, Xiong A, et al. Liver allografts are toleragenic in rats conditioned with posttransplant total lymphoid irradiation [J]. Transplantation, 2007, 84(5): 619-628.

  [6] 黄文鹏, 黄祖发, 叶启发,等. 大鼠肝移植模型的建立及排斥品系的选择[J]. 中国现代手术学杂志, 2007, 11(4): 244-246.

  [7] Schemmer P, Enomoto N, Bradford BU, et al. Activated Kupffer cells cause a hypermetabolic state after gentle in situ manipulation of liver in rats [J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2001, 280(6):G1076-1082.

  [8] Urata K, Nauyen B, Brault A, et al. Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clampin

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