电离辐射对胶质瘤C6细胞垂体瘤转化基因表达的影响

　　1.5 统计学处理 用SPSS 10.0 统计软件进行数据处理。 实验数据以±s表示，实验结果采用单因素方差分析总体有差异后，LSD进一步两两比较各组间差异。P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 不同剂量X射线对胶质瘤C6细胞PTTG mRNA表达的影响 RT-PCR 检测PTTG mRNA的表达显示有496 bp片断的PTTG mRNA特异扩增条带(图1)。与A组比较，不同剂量的X射线均可降低PTTG mRNA的表达，其降低水平随着X射线剂量的增加而增加，单因素方差分析表明4组总体间差异有统计学意义(P<0.01)，LSD进一步两两比较各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。

　　2.2 不同剂量X射线对胶质瘤C6细胞PTTG蛋白表达的影响 PTTG蛋白阳性表达显示主要定位于肿瘤细胞的胞质，弥漫性全细胞分布，少量定位于细胞核(图2)。与A组比较，不同剂量的X射线均可降低PTTG蛋白的表达，其降低水平随着X射线剂量的增加而增加。单因素方差分析表明4组总体间差异有统计学意义(P<0.01)，LSD进一步两两比较显示各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。表1 不同剂量X射线处理后PTTG mRNA及蛋白的表达情况

　　3 讨 论

　　关于电离辐射对基因表达的影响国内外均有较多的报道。各种不同基因的表达对电离辐射的反应不同。鞠桂芝等[1]发现电离辐射可显著促进昆明小鼠胸腺p16 mRNA及其蛋白的表达。Hamasu等[2]报道,5 Gy X射线照射可诱导MKN45及MKN28胃癌细胞凋亡,同时caspase表达明显增高。李平法等[3]报道5 Gy γ射线能显著诱导人乳腺癌细胞hR24L基因的表达。盛方军等[4]证实电离辐射后AT细胞hTERT mRNA表达水平上升，闫风琴等[5]发现电离辐射可以上调小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达水平，Samuni等[6]证实电离辐射能增强人淋巴母细胞瘤中p53的表达。刘光伟等[7]的研究结果表明电离辐射可以诱导生精细胞P53蛋白表达增加的同时凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达下降。

　　PTTG是Pei于1997年首次从大鼠垂体腺瘤GH4细胞中发现的基因，该基因含5个外显子、4个内含子，编码199个氨基酸组成的相对分子质量为25 000的蛋白。PTTG在众多肿瘤中对加速细胞分化、加快肿瘤血管生成、促进肿瘤形成起到重要的作用。PTTG作为促进肿瘤发生、发展的基因与肿瘤细胞周期的调控有密切的关系。关于电离辐射对PTTG的影响国内外鲜见文献报道。本实验运用不同剂量的X射线作用于胶质瘤C6细胞，结果显示电离辐射可降低PTTG mRNA及其蛋白表达水平，并且呈一定的剂量依赖性，即随着X射线剂量的增高，其表达水平下降更明显。

　　细胞的辐射敏感性随着细胞周期时相而改变，在G1期有一定的抵抗性，随着向S期移行敏感性降低，在G1/S边界上敏感性上升，进入S期后下降，在S期末达到最高。进入G2和M期，细胞敏感性上升，即细胞对辐射的敏感性按M期、G2期、G1期、早S期、晚S期依次递减。有研究表明，正常情况下PTTG的表达与肿瘤的细胞周期有明显的相关性。Ramos-Morales等[8]将培养在10%清中的HeLa细胞或Cos细胞转移至0.15%血清中3天以造成细胞缺乏营养,细胞有丝分裂减少,然后检测两种标本中PTTG的表达,发现当细胞有丝分裂时PTTG mRNA的表达明显增高。进一步研究发现PTTG在细胞有丝分裂的G1/S交界期最低,S期升高;在G2/M交界期最高,G1期又开始降低。同时研究证实,在细胞有丝分裂时PTTG蛋白上的Ser165位点被Cdc2磷酸化。当Ser165被Ala替代时或受到Cdc2抗体的干扰时,则PTTG的磷酸化水平下降。这说明PTTG的表达呈细胞周期依赖性。我们认为电离辐射对PTTG的影响可能是通过对细胞周期的影响实现的。

　　本实验初步证实了电离辐射能降低PTTG的表达水平，但同一剂量的放射线在不同时间对PTTG表达的影响如何，该基因对电离辐射的损伤是否有自我修复功能将是我们下一步研究的内容。

　　【参考文献】

　　[1] 鞠桂芝，王小梅，付士波，等.电离辐射对p16基因转录及蛋白表达的的影响[J] .中华放射医学与防

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