pressions of CD44s in invasive pituitary adenoma were correlated with pituitary adenoma invasiveness,CD44s may play an important role in invasive pituitary adenoma and can be used for diagnosis of invasive pituitary. Lower expression of CD44v5 in pituitary adenoma was not related with invasiveness of pituitary adenoma.While the higher expression of CD44s and CD44v5 show the poor prognosis of recurrent pituitary adenoma.
Key word:Pituitary adenoma; CD44; Invasive pituitary adenoma; Non-invasive pituitary adenoma; Recurrent pituitary adenoma
细胞粘附分子CD44是一种与肿瘤侵袭及转移密切相关的跨膜糖蛋白,能介导细胞与细胞,细胞与细胞外间质的特异性粘连。目前的研究已证实在大多数肿瘤中都有CD44蛋白的表达[1],但对垂体腺瘤中CD44蛋白的表达情况少见报道。本文通过检测细胞粘附分子CD44s、CD44v5在垂体腺瘤中的表达,探讨他们对垂体腺瘤生长及预后的意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料收集自2000~2004年华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科手术切除并经病理学证实的垂体腺瘤标本44例。男性21例,女性17例,平均49岁。根据以下三条分为侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤[2]:①术前患者头部MRI;②术中所见有无蝶鞍骨质破坏;③有无硬脑膜侵犯。其中20例为侵袭性垂体腺瘤,MRI显示肿瘤侵犯海绵窦及临近结构、术中可见蝶鞍骨质破坏、鞍底硬膜侵犯;18例为非侵袭性垂体腺瘤;6例为复发性垂体腺瘤。
1.2 试剂和方法CD44s、CD44v5单克隆抗体及即用型链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶(S-P)免疫组化染色超敏试剂盒,DAB显色试剂盒均购自福建迈新生物工程技术公司。免疫组化染色参照其说明书进行:石蜡标本5 μm厚连续切片,常规脱蜡和水化后,分别用过氧化氢酶和动物血清处理10 min。与CD44s、CD44v5单克隆抗体4 ℃过夜。二抗温育20 min,DAB显色5 min,苏木素衬染,各步骤间均以PBS洗片。
1.3 结果判断CD44s、CD44v5阳性细胞定位于细胞膜,表现为细胞膜呈黄色或棕黄色,部分细胞浆染色。每张切片均在×400显微镜下观察,连续观察5个高倍视野,各记数100个细胞取其平均值,以百分数表示,阳性细胞数>30%定为强阳性(++),<30%定为弱阳性(+),未见阳性细胞定为阴性(-)。
1.4 统计学处理采用卡方检验,P<0.05为统计学有显著意义。
2 结果
CD44s在侵袭性及复发性垂体腺瘤中,阳性细胞染色较深,阳性细胞数多,且较集中。而非侵袭性垂体腺瘤中阳性细胞染色浅,阳性细胞数较少,分散(图1~3,见封二)。CD44v5在各组中阳性细胞数均较少,染色浅(图4~6,见封二)。20例侵袭性垂体腺瘤中CD44s阳性染色15例,CD44v5阳性染色7例。18例非侵袭性垂体腺瘤中,CD44s阳性染色5例,CD44v5阳性染色4例。在复发的6例垂体腺瘤中,CD44s均为阳性,CD44v5阳性染色4例。在侵袭组和非侵袭组CD44s蛋白阳性表达具有显著性差异(P<0.01),CD44v5蛋白阳性表达无显著性差异(P>0.05),而在复发组CD44s、 CD44v5均呈高表达,见表1。表1 CD44s、 CD44v5在垂体腺瘤中的表达
3 讨论
细胞粘附分子是一类与肿瘤侵袭与转移有关的跨膜糖蛋白,CD44属于细胞粘附分子家族中的一员,广泛分布于细胞表面,主要参与细胞与细胞、细胞与细胞外基质间特异性粘连过程,是细胞外基质成分透明质酸盐的主要受体[3]。肿瘤细胞通过胞膜的CD44蛋白与透明质酸酶结合,铆定在胞外基质或基底膜上,促进肿瘤细胞的侵袭[4,5]。CD44基因根据外显子的不同编码两种类型的CD44蛋白[3]:标准型CD44(CD44s)和变异型CD44(CD44
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