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银杏内酯A对应激性溃疡发生的抑制作用 |
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e radicals. [MeSH] Ginkgolides/ Pharmacology; Stress; Free radicals; Muscles; Electrophysiology; Ulcer
银杏内酯A是近年从中药银杏叶中提取的主要活性成分之一,其生理和药理学研究表明它是一种天然特异的血小板活化因子(platelet activating factor, PAF)受体拮抗剂,具有清除自由基、抗氧化和影响神经递质释放的特性[1~3]。而应激性溃疡(stress ulcer,SU)常由危重疾病和强烈情绪变化所引起,其发生和发展的机制尚未完全明了。有报道指出[2,4],应激过程中内源性PAF 等炎症介质释放是引起胃粘膜损伤和溃疡发生的重要环节。因此,本实验选择束缚水浸应激溃疡模型,观察银杏内酯在应激状态下对大鼠胃肌电活动变化和血浆自由基水平的影响,探讨其对抗应激性胃溃疡发生的作用及其可能机制。
材 料 和 方 法
一、 动物及分组 健康成年Wistar大鼠60只,雌雄兼用;体重180~250 g(本院动物实验中心提供)。随机分成对照组和银杏内酯预处理组;银杏内酯预处理(银杏内酯A+束缚水浸)组再分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,分别于水浸应激前30 min 腹腔注射银杏内酯A(Ginkgolide A ,中国科学院药检所提供)5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg;对照组以束缚水浸+腹腔注射等量生理盐水。 二、 实验方法 实验大鼠3%戊巴比妥(30 mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开腹腔,将一对针形银丝电极埋置于胃窦部距幽门1 cm处,二电极间为2 mm;电极导线自腹腔穿至皮下,经皮下引至颈部两肩胛间穿出体外。手术后1周开始实验;实验前禁食24 h,自由饮水。缚于鼠板,将其下半身至剑突水平浸于20 ℃左右水中5 h,复制应激性溃疡模型。 三、胃肌电引导 胃平滑肌电信号通过记录电极引入微机接口,由三通道生物信号记录分析系统(MS302,广东药学院提供)记录和储存,再打印输出肌电波形;取时间常数0.01,高频滤波30 Hz;每组动物在应激前记录30 min的基础电活动,并分别于应激后第3~4 h记录胃电活动,观察慢波频率(cycles per minute, cpm)、幅度和异常节律指数(异常节律指数=异常节律时程/记录时程×100%),峰电位发放率(30 min内负载于慢波上的峰簇数占同一时间慢波发生数的百分比)。 四、血浆MDA含量和SOD活性检测 应激5 h后按化学比色法测定血浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性;MDA和SOD测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所。 五、病理形态检查 动物应激结束,取出全胃,沿胃大弯剖开,固定于4%中性多聚甲醛溶液;肉眼和显微镜下观察粘膜病变并测量各溃疡的长径,相加求和,计算其平均值作为溃疡指数(溃疡指数=每组动物溃疡长径的和/每组动物数)并进行比较。 六、统计处理 实验数据以均数±标准差(±s)表示,实验前后
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