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季铵盐消毒剂中检出一株洋葱假单胞菌 |
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代季铵盐消毒剂，对HBsAg抗原性的破坏效果也优于新洁尔灭等单链季铵盐［1，2］。作者在含复合季铵盐1.6%消毒剂中检出一株革兰氏染色阴性菌，该菌在4℃下不生长，41℃迟缓生长，氧化酶、触酶、枸橼酸盐利用试验均阳性；精氨酸双水解酶阴性，能分解麦芽糖、甘露醇、苹果酸、木糖、赖氨酸、鸟氨酸、乳糖，不分解葡萄糖、阿拉伯糖、棉子糖、蔗糖、鼠李糖，经VITEK-Ams和API 20 NE系统鉴定为洋葱假单胞菌，样液中含菌为1.21×105cfu/ml，为了解该菌对消毒因子的抗性，以常用消毒剂对其进行了杀灭试验。
材料与方法
一、季铵盐含量测定及菌株鉴定：消毒剂为浙江省某厂生产的年检产品，批号为970328。主要杀菌成分为双癸基氯化铵和正烷基二甲基苄基氯化铵(烷基为12～16碳)，平均分子量为355.57。以溴酚蓝法测定，季铵盐含量为1.6%。样品pH值为5.6，使用范围为器械消毒、手术室地面及空气、医护人员手及妇科冲洗等。在对产品进行消毒效果检测中，发现送检的批号12瓶样品均有大量革兰氏阴性(G－)杆菌生长，留取菌株进行消毒学试验。
二、定量杀菌试验和HBsAg抗原破坏试验：定量杀菌试验和HBsAg抗原破坏试验分别采用试管内定量混悬法和不锈钢载体法，严格按GB15981-1995《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》进行检测。实验用中和剂使用前均进行筛选，合格后方可采用。
三、最低抑菌浓度(MIC)测定：以无菌蒸馏水将样液对倍稀释后，加入等量双料营养肉汤，加入100μl菌液，使含菌量为104cfu/ml，37℃ 24h观察结果，同时以单料营养肉汤设阳性、阴性对照，以最高稀释度管透明澄清为无菌生长，该浓度即为MIC值。实验重复3次。
结 果
一、杀菌试验结果：
1.戊二醛对细菌繁殖体的杀灭效果：戊二醛为强化中性戊二醛，以三乙醇胺法检测原液含戊二醛为2.00%，临用前以NaHCO3调pH值为7.2左右。经检测该菌株对戊二醛抗力与金黄色葡萄球菌相近(表1)。〔中和剂为1%甘氨酸＋0.5%吐温-80磷酸盐缓冲液(PBS)〕。实验重复5次，结果取均值。
表1 戊二醛对细菌杀灭效果
试验菌株 菌悬液浓度
(cfu/ml) 作用浓度
(戊二醛%) 各作用时间(min)杀灭率(%)
2 5 10 20
大肠杆菌
(ATCC 25922) 4.50×106 0.1 99.99 100.00 100.00 100.00
0.05 99.79 99.99 100.00 100.00
0.025 95.00 99.93 99.99 100.00
金黄色葡萄球菌
(ATCC 6538) 1.12×106 0.2 99.99 100.00 100.00 100.00
0.1 99.69 99.98 100.00 100.00
0.05 94.96 96.51 99.97 99.99
洋葱假单胞菌
(分离株) 1.61×106 0.4 100.00 100.00 100.00 100.00
0.2 100.00 100.00 100.00 100.00
0.1 99.99 99.99 100.00 100.00
2.氯对细菌繁殖体的杀灭效果：氯制剂为二氯异氰尿酸钠。原粉有效氯含量为10.02%。以一定浓度上清液进行杀菌试验。结果表明，该菌株对氯的抵抗力与金黄色葡萄球菌相似(表2)。(中和剂为1%硫代硫酸钠＋0.5%吐温-80PBS)。实验重复5次，结果取均值。
表2 氯对细菌杀灭效果
试验菌株 菌悬液浓度
(cfu/ml) 作用浓度
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