|
铅对红细胞膜蛋白和变形性的影响 |
| |
段永寿 邹成钢 邹学贤 杨叶梅
我们用铅在体外作用于红细胞，研究铅对红细胞膜蛋白、膜封闭度和脂质过氧化作用的影响。
一、材料与方法
硫代巴比妥酸（Sigma公司）、醋酸铅（成都化学试剂厂）、聚乙二醇（Aldrich公司），其余均为国产分析纯试剂。人新鲜全血购自昆明中心血站。按文献的方法制作血影成功后，取一定量红细胞膜，与浓度分别为0、0.005、0.01、0.02、0.04、0.06、0.1、0.2和0.3 mmol/L 的醋酸铅溶液混合。膜蛋白浓度为100～200 mg/L，用MPF-4型荧光分光光度计在20℃和37℃下分别测定膜蛋白内源性荧光，激发波长285 nm，发射波长330 nm。取一定量红细胞，与浓度分别为0、0.005、0.01、0.05和0.1 mmol/L的醋酸铅溶液混合，温育2小时，测定变形性，以有明显钱串形成的聚二乙醇(PEG)浓度表示变形性。再取红细胞膜，与浓度分别为0.005、0.01、0.05和0.1的醋酸铅溶液在37℃温育12小时，测定膜脂质过氧化产物丙二醛(MDA)。
二、结果与讨论
铅可淬灭红细胞膜蛋白内源性荧光，说明铅可与膜蛋白作用并引起构象变化。由于荧光淬灭是非特异性的，仅在一定范围内荧光强度和淬灭剂浓度符合Stern-volmer公式：F0/F=1+KD(Q)，式中F0和F分别为无铅和有铅存在时膜蛋白在330 nm处荧光强度，(Q)为铅溶液浓度，KD为淬灭常数。如淬灭剂对蛋白质的荧光淬灭随温度增高，KD值减少，则是由于淬灭剂与蛋白质形成不发光或发光减弱的复合物所致。铅在37℃时淬灭膜蛋白荧光的能力(KD =1.43)明显低于20℃时(KD=2.54)，说明铅与膜蛋白可形成复合物。
PEG的非渗透性造成膜两测渗透压差别，并转变为弹性压力。为降低体系自由能，红细胞变形为钱串状聚合。有明显钱串形成的PEG起始浓度（Ci）反映形成钱串的难易程度，Ci越大，红细胞变形性越小。在上述浓度下，Ci分别为(0.42±0.05)％、(0.49±0.04)％、(0.52±0.04)％、(0.59±0.04)％和(0.64±0.05)％，与无铅组相比P<0.05，可见随铅浓度增加Ci也增加，说明铅可使红细胞变形性下降，并有剂量-效应关系。
铅与红细胞膜同时温育，MDA测得值与对照组相比，差异无显著性，说明铅不能直接启动红细胞膜脂质过氧化作用。
红细胞变形性对红细胞的生存至关重要，它保证了红细胞能通过比自身直径更小的毛细血管。本研究发现，铅可致红细胞变形性下降，并有明显的剂量-效应关系，说明铅作用的红细胞由于变形性减退，在血流湍急处，机械冲击或通过比它小的毛细血管时容易破损而发生溶血。膜蛋白组分和功能状态是影响红细胞变形性的重要因素。
本研究表明，铅可与红细胞膜蛋白形成复合物，引起红细胞膜蛋白结构的变化，这也许是造成红细胞变形性降低的原因之一。研究还表明，在体外，铅对红细胞膜脂质过氧化作用影响较小。
作者单位：650032 云南省 昆明医学院第一附属医院
上一个医学论文： 维生素A对胸腺细胞凋亡的影响
下一个医学论文： 临沂市流行性乙型脑炎流行因素分析
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文