凋亡调节因子与药物耐受性

　　C-myc癌基因为一种参与细胞分化和恶性增殖的核蛋白型癌基因，具有促使DNA复制的功能，可在一些致癌因素作用下（如病毒、放射性和化学诱变剂）发生基因重排和扩增而得以活化。C-myc基因表达既可促进细胞增殖又可促使细胞凋亡，这种相互对立的作用受生长因子等调控。

　　C-myc与P-gp的关系还不清楚，但有报告采用Southern印记杂交分析，发现同一恶性脑胶质瘤细胞发生C-myc基因重排及MDR1基因限制性片段扩增现象，推测C-myc基因活性MDR1基因的变化和脑胶质瘤耐药株的耐药性可能存在较为密切的关系。但另一作者采用免疫组化方法研究67例胃癌标本中p53、C-myc和P-gp的表达，P53的异常表达与P-gp表达呈显著正相关（r-0.63,P＜0.05）,C-myc和P-gp的表达无明显相关。

　　N-myc也编码一个调节转录的核酸化蛋白。N-myc基因的扩增与MRP表达增加有关。Bordow[19]采用Rt-PCR观察25例神经母细胞瘤标本，N-myc基因扩增的标本，MRP基因表达水平亦明显增高（P=0.0016），而MDR1基因表达与N-myc癌基因扩增无明显关系。采用N-myc癌基因抑制剂RA研究神经母细胞瘤细胞株SH-SYSY和BE（2）-C，RA抑制N-myc基因表达后，MRP表达随之下降（P-=0.0017），而MDR1基因表达量却增加（P＜0.05）。Norris[20]分析60例原发性神经母细胞瘤标本，亦发现在N-myc扩增的肿瘤，MRP表达水平明显增（P＜0.001）。

　　Kopnin[2]分析人ras基因对MDR1mRNA和P-gp表达影响。ras基因除能激活外源性MDR1基因启动子外，还能引起内源性MDR1mRNA水平升高，P-gp活性增加并使Rhodamine123外排增多，细胞对秋水仙素和其它一些化疗药物的耐药性亦增加。Chin[22]研究发现人MDR1基因启动子也是ras癌基因的靶位点，虽然其产物对MDR1基因的正向调节是非特异的，但与突变型p53有协同作用，而wt-p53无此作用。

　　4 多药耐药性研究进展

　　最近研究资料发现耐药蛋白的表达与其启动子甲基化状态有关。Nakayama[23]采用定量Rt-PCR检测42例急性白血病标本，发现MDR1基因启动子上CpG位点甲基化状态与MDR1基因表达呈负相关。推测MDR1基因表达的必须条件。Kantharids[24]在T细胞白血病细胞株，采用甲基化敏感和甲基化不敏感的限制酶进行Southern杂交分析，MDR现象与MDR1基因5’端去甲基化明显相关。采用去甲基化因子5’一氮脱氧嘧啶治疗P-gp表达阴性和阳性细胞株消除MDR1mRNA表达，可增加细胞对表柔比星（daunomycin）的耐受性。

　　另外一些研究发现非细胞毒性剂量的一些基因毒性药物，特别是DNA交联因子，优先改变可诱导的基因表达，这些作用主要发生在转录水平并引起暂时时性的DNA损伤。Ihuat[25]发现DNA烷化剂丝裂霉素C能明显MDR1mRNA及P-gp表达，并减少药物外输，对ADM耐受性减少到5到10倍。亚细胞毒性的CDDP也有此功能。在单层和球形培养的人和啮齿动物的结肠癌、乳腺癌、白血病、神经母细胞瘤和肝癌细胞株都观察到此现象。

　　Kimsh[26]研究发现MDR1基因启动子含有热休克应答元件，能与热休克反应元件结合，采用榭皮素（quereetin）抑制热休克应答元件与应答因子间的结合，能逆转MDR1介导的耐药性。

　　由于细胞凋亡的相关调节因子介入多药耐药机制，使得肿瘤细胞对化疗药物耐受机制更加错综复杂。因此，在肿瘤细胞耐药性研究中，应从多角度、全方位考虑，才能制定出罗好的治疗方案。另外，对凋亡调节因子介导耐药机制的研究，可通过加强诱导细胞凋亡的途径克服耐药性。为恶性肿瘤的基因治疗提供一些实验依据。

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