凋亡调节因子与药物耐受性

　　1.3 p53与bcl-2家庭间的相互影响

　　细胞凋亡是一个多因子参加的复杂的生理过程，药物影响能诱发p53和bcl-2等蛋白发生一系列变化，参与细胞的耐药性。

　　Miyashi[9]研究发现wt-p53能与bcl-2基因上p53依赖性的负反应元件结合抑制bcl-2的表达。Eliopoulos[10]检测p53和bcl-2蛋白在敏感和耐药的卵巢癌细胞株中表达水平，结果显示耐药株过度表达p53和bcl-2蛋白，且bcl-2作用环节可能在p53之上。许多临床资料亦发现突变型p53和bcl-2蛋白的高表达与不良预后有关。

　　Ju[11]将wt-p53传染wt-p53阴性的HL-60细胞形成转染株SN3，与母代细胞相比，对化疗药物的敏感性明显增加，如对CDDP和胸苷（thymidine）的敏感性分别增加2倍和50倍；而用突变型p53传染的细胞无比现象。用胸苷合成酶抑制剂FdUrd观察与p53相关联基因表达变化，在各种浓度的FdUrd存在下，很大比例的SN3细胞发生凋亡，而不是停留在S期。母代细胞有不确定的bax水平和高水平的bcl-2表达。在SN3细胞bcl-2检测不出，并维持适当基础水平的bax。FdUrd治疗后，wt-p53和bax水平增加，但bax诱导早于p53，且平行出现细胞凋亡的DNA条带。Perego[12]检测p53与顺铂导致耐药性间的关系时，发现在卵巢癌药细胞株中，突变型p53失去激活bax基因转录能力。

　　这些资料说明p53、bax-2和bax等凋亡调节因子在肿瘤细胞的耐药机制中起重要作用，但作用方式是复杂多样的。

　　2 p53对耐药蛋白的调节作用

　　p53具有不同结构区域。wt-p53与DNA共有区结合后，能正向调节一系列下游基因的表达。另外，wt-姢负向调节许多缺乏wt-p53共有区结合位点基因，包括DNA topoⅡα、MDRI、c-fos和其它病毒和细胞的启动子。

　　2.1 p53对多药耐药相关蛋白（MRP）表达的调节

　　转录因子spl是MRP基因启动子的强激动剂，wt-姢与spl结合，消除spl作用，从转录水平调节MRP表达。Wang[13]将带有虫荧光素酶标记报告基因的MRP启动子与wt-p53共同转染p53阴性的人类非小细胞肺癌细胞株H1299和鼠（10）1细胞，结果显示wt-p53能呈剂量依赖性地显著抑制MRP启动子活性，wt-忍气吞声作用位点为-91到+103bp，该处有数个spl结合位点；而突为型p53只有很弱的作用。同时研究还发现wt-p53还能抑制高表达MRP的CEM/VM-1-5细胞的内源性MRP表达。Oshika[14]采用免疫组化技术检测107例非小细胞肺癌标本，MRP和突变型p53表达有明显相关性，双染色技术显示p53和MRP在一些细胞上同时表达，这些病人预后明显罗无MRP和突变型p53患者差。

　　2.2 p53CF p-糖蛋白（P-gp）表达的调节

　　P-gp是有MDR1基因编码的多药耐药蛋白。wt-作用于MDR1下游启动子，从转录水平P-gp的表达。Straussp[15]将wt-p53与由MDR1下游启动子控制的报告分子共同转染BHK和Sacs-2细胞株，发现wt-p53呈剂量依赖性MDR1基因启动子活性。Strauss[16]在另一 研究中发现部分p53的突变体能激活MDR2基因下游启动子转录活恪，他将这种p53突变称为“获得功能性突变”。Linn[17]采用双重免疫组化染色，核p53聚集和P-gp表达经常发生在同一肿瘤细胞，且这种情况在浸润进展期的乳腺癌中更易见到。其推测共同表达突变型p53和P-gp属于一系列分子事件，能导致肿瘤浸润、药物耐受，产生不良预后。

　　3 其它凋亡调节因子对耐药蛋白的调节作用

　　Bcl-2与P-gp作用尚不明确，但Eid[20]采用免疫

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