实验性变态反应性脑脊髓炎与细胞凋亡

　　摘要： 实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)是研究人类多发性硬化(MS)的 经典动物模型，EAE发 病和愈复过程中细胞凋亡的情况也是目前神经生物学的研究热点。研究者们发现，EAE时CNS 损伤区有自身反应性T淋巴细胞的凋亡，而且这种细胞凋亡促进了EAE的愈复和耐受状态的形 成，这就为EAE乃至人类MS的防治提供了一条新思路。有关EAE其他细胞 凋亡和影响细胞凋亡的因素也有一些研究。本综述对近年来这些方面的研究进展做了较为 全面的回顾。

　　实验性变态反应性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）是T细 胞介导的中枢神经系统（central nervous system, CNS）脱髓鞘疾病，是人类脱髓鞘疾病 ——多发性硬化 （multiple sclerosis, MS）的经典动物模型。研究EAE的发病及愈复机制 ，对于MS的预防和治疗都有重要意义。有关EAE发病机制的研究近年来有以下进展：（1）介 导EAE发病的淋巴细胞更具体地归类为CD4+Vβ 8.2+T细胞；（2）淋巴细胞产生的细胞 因子如IL-2、IL-4、IL-10、TNF、IFN-γ、TGF-β等，直接参与炎症反应或反应的修 复；（ 3）NO参与EAE的发病，但不同的研究者用不同的动物和诱导方式以及不同的NOS拮抗剂，得 出不同结果［1，2］，因而NO的作用有待进一步明确；（4）Fas/Fas-L系统促进少 突 胶质细胞的损伤，参与EAE的发病［3-6］；（5）细胞凋亡(apoptosis)与EAE发病有 关，尤其在EAE的愈复和免疫耐受形成中起重要作用。

　　细胞凋亡与免疫系统的关系极为密切，淋巴细胞的凋亡涉及到自身免疫性疾病的康复及耐 受机制的形成。对于EAE也不例外。

　　早在60年代中期，就有人发现EAE病程中有细胞死亡，并认为是少突胶质细胞、单核细胞和 淋巴细胞死亡。随着凋亡概念的出现和检测技术的发展，Pender等从形态学上证实EAE中的 细胞死亡以凋亡的形式出现，并认为其中有少突胶质细胞，而后又发现更多的凋亡细胞是T 淋巴细胞，还有一些为巨噬细胞［7］。这些研究成果激起学者们的浓厚兴趣，促进 了对此问题的深入探讨。

　　目前，对凋亡淋巴细胞的进一步分类、影响凋亡的因素以及凋亡的意义等，都有了很多新的 发现。

　　1　EAE中凋亡的细胞

　　1.1　少突胶质细胞　Pender等在证实EAE病程中有细胞凋亡存在的同时发 现：凋亡细胞出现 在CNS的灰质和白质中；白质中的凋亡细胞与正常的有髓纤维毗邻，慢性EAE中则与脱髓鞘的 纤维毗邻；灰质中的凋亡细胞与神经元胞体和髓鞘毗邻；在含有髓鞘碎片、毗邻脱髓鞘轴突 的巨噬细胞中有凋亡的细胞体。前人也曾注意到，Cuprizone中毒小鼠CNS中正在死亡 的少突胶质细胞有明显的染色质边集和核分裂，形成几个大的致密团块。于是，根据凋亡细 胞的大小和位置，Pender等推测凋亡的细胞为少突胶质细胞。但是，对于这种细胞的定性， 却没有更具说服力的证据。曾有人提出不同观点，认为EAE时少突胶质细胞不是凋亡，而是 细胞溶解。用TUNEL技术检测EAE的凋亡细胞，也未检测到呈阳性反应的少突胶质细胞，从而 否定了少突胶质细胞的凋亡［8］。

　　1.2　淋巴细胞　Pender等虽然没有为少突胶质细胞的凋亡提供更多的证据 ，但在提出“EAE 的CNS中可能有特异性淋巴细胞的凋亡”后又进行了一系列的研究。1992年他们使用包埋 前免疫标记技术发现，CNS中10%CD4+细胞和5%αβ T淋巴细胞发生凋亡。而凋亡细胞中， 51%被OX-34标记，38%被R73标记。由此得出结论：急性MBP诱导的EAE,脊髓中的凋亡细胞至 少一半以上是T淋巴细胞，并很有可能是自身反应性 的、MBP激活的特异性T淋巴细胞(即MBP -特异性T细胞)。其他研究者也发现，脑损伤区的凋亡细胞64%为T淋巴细胞。1994年他们在 被动转移的EAE模型用流式细胞仪分析细胞表型和DNA，证实了自身反应性T细胞的凋亡 ［9］。该研究发现，Vβ 8.2+T细胞在凋亡细胞中的比例是其在正常T淋巴细胞群中的 7倍，显示出凋亡细胞中Vβ 8.2+细胞的高度聚集，得出“自身反应性Vβ 8.2+T细胞 以凋亡的方式从靶器官中选择性消除”的结论。在主动诱导的EAE也得到类似的结果［1 0］。1995年他们使用有限稀释法分析发现，被动转移的EAE在发病高峰期脊髓中MBP-特 异性淋巴细胞，即Vβ

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