【摘要】目的:比较小鼠卵巢组织在不同降温速率过程中组织形态学变化情况,初步确定合适的冷冻方案,为进一步确定人类卵巢组织冷冻方案提供依据。方法:取10个21天大小雌性ICR小鼠双侧卵巢,剪成~1×1×1cm3大小的组织块约80块,随机均分到新鲜(未冷冻的空白对照)、快速(直接投入液氮中)、中速(液氮气液交界面上悬挂12小时后投入液氮中)和慢速冷冻(通过程序冷冻仪逐步降温后投入液氮中)四组分别进行冷冻保存。5天后解冻复苏作组织切片,光镜下观察比较各组卵泡、卵子和颗粒细胞形态及相互之间分布情况,记录并计算组织中不同发育阶段卵泡的比例。结果:各组不同发育阶段卵泡构成比无明显差异,本次实验发现21天大小的ICR小鼠卵巢组织中原始卵泡占5.3%,初级卵泡占7.6%,次级卵泡占85.7%,偶见少量窦卵泡,未见典型的始基卵泡。四组卵子出现皱缩的比例分别为3.9%、42.6%、41.6%和34.9%;卵子保持圆形但胞浆内空泡体积>10%的分别占16.2%、57.2%、59.6%和19.5%;所以四组形态基本正常的卵子率依次为80.6%、24.3%、23.6%和52.4%,其中慢速组在所有冷冻组中最高,但较新鲜组明显降低。结论:慢速冷冻结合植冰是小鼠卵巢组织冷冻保存比较有效的方案,但是冷冻方案尚需进一步完善。
【关键词】小鼠卵巢组织 冷冻方案 形态
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