清道夫受体A基因的表达和调控研究进展

　　血管内皮细胞有清道夫受体活性，但研究表明原代培养的兔静脉和牛主动脉内皮细胞上无SR-AⅠ、SR-AⅡ受体mRNA表达，用PMA诱导亦不能增加SR-A的表达和AcLDL的摄入，提示血管内皮细胞表面缺乏SR-A活性，其对修饰脂蛋白的摄入可能通过其它类型SR途径实现的[6]。某些SMC株可能存在不同水平的SR受体活性，用PMA处理的SMC对AcLDL的降解增加大约5倍，荧光分选法发现从喂高脂高胆固醇饲料的兔主动脉分离的SMC对AcLDL降解水平明显升高，提示AS斑块来源的SMC，其生物学特性就其SR活性而言是不同的，可能是某些生长因子能刺激SR表达，如果这些刺激因子是来源于巨噬细胞源性泡沫细胞，这就可以解释为何斑块中SMC源性泡沫细胞形成迟于巨噬细胞源性泡沫细胞[4]。Bickel等人[5]从新西兰兔主动脉SMC克隆出的SR与鼠、人、牛SR-AⅠ或Ⅱ比较，其cDNA及氨基酸水平的同源性均在70%以上。提示SMC上的SR-A受体活性可能是SMC源性泡沫细胞形成的主要原因。

　　3 清道夫受体基因调控元件与表达调控

　　在细胞培养体系中，发现许多因素可影响SR的活性或基因表达，如佛波酯、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）、血小板分泌产物等能促进SR-A表达、内毒素、肿瘤坏死因子、γ-干扰素等可使SR-A表达下调。但不同的因子SR-A表达调控机制不同，这可能与作用于SR-A基因不同调节元件有关。

　　Moulton[9]等人将人和牛SR-A启动子序列-696～+46和-814～+46分别转到不同的细胞内，检测其对荧光素酶活性的影响，结果表明，在THP-1、P388D1和U937等巨噬细胞样细胞中，荧光素酶活性明显增加，而在HeLa细胞等非巨噬细胞样细胞中，荧光素酶活性较低。提示SR-A翻译起始区上游序列具有巨噬细胞特异性。通过基因转染、DNaseⅠ足迹分析、直接点突变等方法已明确了SR-A基因启动子有3个功能性顺式作用调节区，即启动子区、增强子区、抑制子区[10]。

　　SR-A启动子位于主要转录起始位点上游的-245～+46之间，包含两个转录因子结合区[9]。一是PU.1/Spi-1转录因子结合区。PU.1/Spi-1是一种ets区转录因子，PU.1中心识别基序（core recognition motif）存在于大多数巨噬细胞及B细胞特异性表达的基因启动子上，如免疫球蛋白κ和λ基因及免疫球蛋白J链基因、CD11a、CD11c、巨噬细胞炎症蛋白-α等，PU.1/Spi-1能有效地介导SR-A的细胞特异性表达。提示SR-A启动子上PU.1/Spi-1识别位点与SR-A基因的巨噬细胞特异性表达有关。二是一个ets区蛋白复合物结合位点，可与AP-1基因家族蛋白（如c-Jun、JunB蛋白等）有高度亲和性，能形成三重复合物，这些蛋白质能共同促进SR-A的表达[7]。

　　序列分析表明SR-A基因启动子区缺乏通常的TATA盒，只是在SR-A cDNA的5’端翻译起始区上游-18～-37bp间有两个TATA样序列；没有LDL受体启动子的CCAAT盒；在SR-A的启动子区也没有发现类似LDL受体基因受固醇调节的固醇类反应元件序列，这一结果与清道夫受体活性一致，不受胆固醇调节，使脂质易于在细胞内集聚形成泡沫细胞[2]。

　　SR-A增强子区位于-4.1～-4.8kb［9，10］，是PMA诱导SR-A表达必需的区域。PMA对SR的转录激活作用是由AP-1和ets区转录因子分别结合到启动子和增强子区所介导的[7]。

　　SR-A抑制子区位于-4.8～-6.5kb处，可抑制70%～80%的SR-A启动子活性，能抑制未分化THP-1细胞向巨噬细胞的分化。抑制区的缺失，可使TPA诱导的SR-A表达水平明显增加，与疱疹病毒的胸苷酸激酶启动子 共同组成的片段能抑制TPA诱导的加强反应。在-592～－570和-424～－402之间各有一个23bp的颠倒重复序列，这个重复序列中含有一段GGGATTA-CA序列，与介导白介素-2基因在T淋巴细胞特异表达的T细胞元件GGGPuTTT(C/A)A高度同源[2]。

　　这3个顺式作用元件中都含有AP-1基因家族成员蛋白的保守结合序列（TGA（G/C）TCA），同时，在增强子及抑制子区还含有ets区转录因子的结合序列。c-Jun、est2和组成型ras的共同表达，可协同增加含

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