血液流变活性药物的体外研究概况

　　2　其它试验是对流变学测量的补充

　　利用流变学试验在细胞水平证明药物的影响是非常重要的，但是其敏感性和专一性很有 限，比如说：阻止Ca2+流入和K+流出镰刀状红细胞的阳离子通道抑制剂能防止细胞 失水，研究其作用时可先将细胞脱水后，采用5 μm孔径的滤膜来定量测定细胞膜变形性的 序贯下降［3］。更为敏感的方法是用同位素如45Ca、86Rb标记， β-闪烁计数确定阳离子流动［4］，但使用流变学模型来证实其对完整细胞的作用 非常有用，两种方法可看作是互相补充。

　　3　采用动力学试验模型

　　处于代谢静止状态的静态细胞不适合用来研究药物的作用，采用适当的生理和代谢动力 模型可以增加流变学试验的敏感性和特异性。例如，对红细胞与内皮细胞粘附力测量的试验 中采用的是生理应力模型而不是静态模型［5］。非离子表面活性剂［6］对此 模型有抑制作用。

　　抗镰药物的研究很困难，因为镰刀状细胞在其变形性、密度、年龄、膜性质和形态诸方 面有很大的异质性，然而采用密度梯度离心可以去除密度较大和不可逆的镰状细胞，剩下较 均匀的年轻细胞群体，体外在含钙的缓冲液中，经历还原和氧化的循环，来模拟在体内循环 时的复杂过程。这些年轻细胞将发生进行性的脱水，Ca2+通道抑制剂和钙激活K+流 动通道抑制剂，以及其它抗镰药物可用于研究对此模型中代谢应力的保护作用。

　　采用循环气体交换模拟体内代谢因力，可以扩展到局部贫血血管疾病，在那里循环的血 细胞暴露在低氧、低pH和/或高渗透压的环境中，在此情形下存在着的交替改变非常复杂， 并具有时间依赖性。这是因为局部贫血部位的低pH按照Gibbs-Donnan效应可引起细胞肿胀 ，随后经pH激活的KCl转移导致细胞K+丢失，细胞再次收缩［7］，局部贫血部位的 乳酸累积，由于渗透作用也引起细胞脱水。通过将正常红细胞重复多次置于低氧、酸性和含 有不同药物浓度的高渗透液中，采用循环气体交换可以验证药物的预防作用。这种体外的试 验模型要比血管疾病的静脉血样本接近病理，因为一旦离开局部贫血部位的代谢应力环境， 而循环到静脉抽血处，红细胞迅速恢复正常代谢和流变状态。

　　4　不可预见性的药物作用

　　药物对血细胞流变学作用不可能总是能够借助药理文献而预料，并由此在体外以合适模 型进行实验。血管扩张剂和钙阻滞剂硝苯地平就是一个很好的例子，在兴奋组织这个二氢吡 啶类化合物能阻断Ca2+进入细胞，它对循环血细胞作用尚未广泛研究，除了能阻止Ca 2+流入红细胞外，它还是一个作用很强的Ca2+激活的K+通道抑制剂［4 ］。因此其作为抗镰药物的优势可能在于其血管扩张作用，Ca2+进入阻滞及K+流 动抑制作用之间的综合，在局部贫血血管疾病，硝苯地平的流变学作用很复杂，除了对红细 胞的作用外，对激活嗜中性白细胞与血管内皮细胞间的粘附有着浓度依赖性的抑制作用 ［8］。

　　总之，流变活性药物的体外实验有着巨大的潜在优势，因为这些实验能解释流变学效应 和药物的作用。体外实验方法特别适合于一系列药物浓度的研究和寻找活性化合物如中草药 ，因其组成复杂，需经分离以寻找有效的类似物，在药物试验的预试阶段，流变 学方法研究 药物对完整血细胞的功效非常优越，而生化和同位素研究往往是针对破碎细胞。

　　在临床试验中对体外获得的血样进行试验来确定临床效果和流变学作用的关系很有价值 。另外流变学试验能补充临床结论，增加临床试验的价值，提供简易方法用于先导性研究， 证明新试化合物的作用。流变学方法在解释血管疾病的病理生理和确定合理有效药物治疗方 面具有优越性。

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