tance between carcinoma and normal tissue was 0.2cm.The results by RII and GDP showed that the operation should be performed in 18 hours after injecting99mTc labelled COC183B2-F(ab′)2.Conclusions:The above studies proved that RIGS with99mTc labelled COC183B2-F(ab′)2 is practical and hopefully be used clinically for ovarian carcinoma.
Key words Ovarian neoplasms;Radioimmunoguided surgery；Antibodies,monoclonal;Tc-99m
目前卵巢癌以手术治疗为主，术中探查多以术者视诊、触诊为主对肿瘤进行判定，但因术者临床经验不同，结果分期不够准确，切除范围不足或过大。因此，研究一种客观准确在术中能对肿瘤浸润以及转移范围进行判定的方法，对制定合理个体化的手术方案具有重要意义。采用核素标记单抗进行肿瘤放射免疫导向手术(radioimmunoguided surgery,RIGS)，可帮助术者在术中判定是否存在瘤灶，有的放矢地进行手术切除。结直肠癌RIGS 临床应用显示术中可改变手术切除方案，提高患者生存率及生存质量［1］。国外有关卵巢癌RIGS的报道较少，国内尚无。本研究旨在采用99mTc标记卵巢癌单抗进行研究，为临床卵巢癌手术治疗提供帮助。
1 材料与方法
1.1 材料 COC183 B2及其片段F(ab′)2由本中心制备［2］，正常鼠IgG由军事医学科学院提供，荷人卵巢癌裸鼠移植瘤模型由本中心建立［3］，99mTc淋洗液由北京401所提供，亚锡羟甲基二膦酸盐(MDP)和注射用亚锡葡庚糖酸(GH)系上海医科大学红旗制药厂产，硼酸系辽宁铁岭开原化工厂产。
氯化亚锡溶液：称取氯化亚锡1.2mg溶于1.2ml的去氧水，加入到含12mg?GH的试剂盒中，充氮气后密封。
手持式γ探测仪(hand-held gamma detecting probe,GDP)由本中心与中国原子能研究院共同研制［4］。
1.2 方法
1.2.1 99mTc标记单抗COC183B2-F(ab′)2 采用改进的预锡法进行单抗COC183B2-F(ab′)299mTc标记。取0.1ml?(10g/L)?COC183B2-F?(ab′)2?和0.5ml的硼酸盐缓冲液(0.1mol,pH?9.3)混合加入清洁青霉素小瓶中，再加入185MBq(740MBq/ml)的99mTc淋洗液；另再加50μl氯化亚锡溶液，最后充入氮气(105Pa,5min)，密封，37℃恒温水浴2h。2h后采用快速纸层析法测定标记率，并进行标记片段的移植瘤免疫组化染色(PAP法)，观察标记后片段的免疫活性［5］。
1.2.2 GDP对99mTc-COC183B2及其片段F(ab′)2放免导向探测 荷人卵巢癌腹水瘤动物模型由本中心制备［3］，细胞系为SKOV3(ATCC)。将8只荷人卵巢癌腹水瘤裸鼠随机分为两组，其中单抗组4只，注射99mTc-COC183B2-F(ab′)2(0.78mCi/0.18mg)，对照组4只，注射99mTC-NMIgG，(0.8mCi/0.2mg)。注射后体外采用GDP和针孔准直器探头γ相机显像初步判定手术时机。显像满意后，处死裸鼠，沿正中打开胸腔和腹腔，暴露各器官。然后用GDP依次对肿瘤及其邻近正常组织即肝、脾、肠、肌肉进行体内探测(每次计数20s，共3次)。探测完毕切除取下各脏器称重，再用井型探测仪进行放射性测量(计数10s，重复3次取平均值为各部位测量数据)；最后计算各组织单位质量放射性计数(min-1)和各组肿瘤/非肿瘤放射性(T/NT)比值。
2 结 果
2.1 单抗COC183B2-F(ab′)2的99mTc标记率及标记后活性 用改进预锡法在pH?9.3硼酸盐缓冲液中进行99mTc标记COC183B2片段F(ab′)2，标记率达95%以上。99mTc-COC183B2-F(ab′)2与移植瘤PAP免疫组化染色呈阳性，可见瘤细胞膜及胞浆有棕黄色颗粒；而NMIgG
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