IL-2R酶联免疫试剂盒(白求恩医科大学基础学院免疫教研室提供)。
(2)牛血清白蛋白(sigma公司提供)。
(3)55孔酶联吸附板(四川分析仪器厂)。
(4)酶联免疫检测仪GXM-202(四川仪表九厂)。
4 实验方法:
(1)标本采集:①采受试者肘静脉血5ml,离心3500转/分×15分钟,分装血清,标号贮于-20℃待测。②支气管冲洗液:以olympus纤支镜检查,常规操作,经鼻腔插入。肺癌组纤支镜物镜置于肺癌侵犯支气管的近心端,如镜下不能见到病变,则置于病变相应部位亚肺段支气管口,然后以0.9%生理盐水20ml分两次注入后立即回抽(吸引器负压为13.3~26.7kPa),回抽量4~9ml,平均5.5ml,收集后离心3500转/分×15分钟,分装上清液,标号贮于-20℃待测。
(2)实验步骤:sIL-2R测定,采用双抗体夹心法(EILSA),严格按照试剂盒要求操作。
5 统计学方法:
多组间比较采用完全随机设计方差分析和最小显著差法分析,组间比较采用t检验,率间比较采用χ2分析。
结果
1 支气管冲洗液肺癌组,正常对照组sIL-2R的表达。
(1)肺癌组及正常对照组支气管冲洗液中sIL-2R检出率,见表1。
表1 LC与NC支气管冲洗液sIL-2R检出率
组别 sIL-2R 合计
阳性例数 阴性例数
LC 31 14 45
NC 3 7 10
合计 34 21 55
LC与NC P<0.05
(2)肺癌组与正常对照组支气管冲洗液中可测出的sIL-2R的+S(u/ml)见表2。
表2 LC与NC支气管冲洗液中可测出sIL-2R的+S(u/ml)
组别 N ±S
LC 31 203.80±142.92
NC 3 30.44±11.73
LC与NC P<0.05
注:LC组14例,NC组7例未测出sIL-2R未平均在内二肺癌组、肺良性疾病组与正常对照组血清中sIL-2R水平。
2 LC、BPD、NC血清sIL-2R的±S(u/ml)见表3。
表3 LC、BPD、NC血清sIL-2R的±S(u/ml)
LC BPD NC
N 57 20 20
±S 976±276 731±240 386±119
LC、BPD与NC之间P<0.05
LC与BPD之间P<0.05
3 肺鳞癌(Scc)、腺癌(Adc)、小细胞肺癌(Sclc)及肺泡细胞癌(Acc)血清sIL-2R的±S(u/ml)见表4。
表4 各型肺癌血清sIL-2R的±S(u/ml)
Scc Adc Sclc Acc
N 39 8 9 1
±S 971±286 1064±181 876±251 1564
Scc、Adc及Sclc各组之间P>0.05
4 肺癌血清sIL-2R与TNM分期的关系见表5。
表5 肺癌患者血清sIL-2R与TNM分期
Ⅰ~Ⅱ Ⅲ Ⅳ
N 31 18 3
±S 889±227 1083±206 1168±182
Ⅲ与Ⅰ~Ⅱ、Ⅳ与Ⅰ~Ⅱ P<0.05
讨论
尽管本文肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率及测得活性均值与正常对照组比较差别有显著性(P<0.05),然而肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率仅为68.8%,有31.2%的未能测出,且可测出的sIL-2R的均值远低于其血清均值,可能与肺癌病灶内血供较丰富,肿瘤相关抗原刺激机体免疫系统,激活的T淋巴细胞形成的sIL-2R直接进入血液中,且sIL-2R的分子量
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