所有实验犬均于术前24h禁食,饮水,3%戊巴比妥钠后肢小隐静脉注射(剂量为30mg/kg体重),麻醉后仰卧固定于动物手术台上,气管插管,在无菌条件下行右侧股静脉插管采血于肝素抗凝瓶中,剪毛铺巾,经上腹部正中切口逐层进腹,探查胰腺,在胆总管入肠壁远侧缝扎副胰管,在十二指肠系膜内找到主胰管,紧贴十二指肠壁结扎其远端,近端向胰腺内插入1.0mm导管,深度约1.0cm,固定,另从皮肤切一小口引出体外并固定于腹壁,接三通开关,并与生理记录仪及胆汁灌注导管相连,胆囊造瘘。插入直径5mm塑料导管,缝合固定,另从皮肤开一小口引出体外,接无菌瓶引流胆汁备用。
(2)取材:取灌注胆汁前,后3、6、12,24、48、72h在无菌条件下分别经股静脉插管采血分离血清,采血同时从胰腺不同部位快速采取病变明显胰组织,作形态学,光镜和电镜标本检查。
(3)血清溶菌酶和血清总补体活性测定,分别采用琼脂糖平板溶菌,溶血法[1、2]。
结果
1 形态学检查:在光镜和电镜下观察其形态结构,标本制作按光镜,电镜制作常规并根据Hansson标准[3]对胰组织的坏死进行分级,在整个实验过程中,胰腺结构正常者7例,出现充血,水肿性改变11例(另7例后出现或伴有坏死改变)平均8.72±6.07h,开始出现充血,水肿性改变,出现坏死性改变者12例,平均于10.75±6.94h出现坏死性改变。
表1 血清溶菌酶测定结果(mg/L)
O 3h 6h 12h 24h 48h 72h
对照(n=7) 8.56±3.96 8.33±3.41 8.43±3.33 8.24±3.73 8.10±4.55 8.27±3.74 8.64±4.06
水肿性(n=11) 8.70±2.99 8.26±3.13 8.34±2.85 8.30±3.12 12.77±3.59* 12.3±3.48* 13.067±3.49*
坏死性(n=12) 8.31±2.13 7.68±2.59 9.31±2.93 8.44±2.21 14.91±2.84* 13.6±3.54* 13.47±4.80*
*与对照比较P<0.01
从结果看,水肿性与坏死性组于24h起升高,与对照组比较差异显著(P<0.01),但坏死性与水肿性组间差异不显著(P>0.05)。
表2 血清总补体测定结果(u/ml)
O 3h 6h 12h 24h 48h 72h
对照(n=7) 90.18±26.99 88.53±27.7 91.15±27.64 89.99±25.02 87.16±21.51 86.88±21.94 85.28±18.77
水肿性(n=11) 89.15±22.52 90.4±21.68 86.69±14.32 78.73±17.61 80.35±20.64 87.2±18.72 87.31±13.37
坏死性(n=12) 86.35±12.38 90.67±16.4 89.26±12.86 85.72±11.99 51.84±14.45* 53.54±11.07* 56.13±10.72*
*与对照比较P<0.01
从上表可见,坏死性胰腺炎组从24h起开始明显降低,与对照及水肿性组相比差异明显(P<0.01)。
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