人肝癌中P16蛋白的表达缺失与意义

黄建钊　沈文律　李波　罗义刚　程娘

　　摘要　用免疫组化法对35例手术切除的原发性肝细胞性肝癌(HCC)标本中P16蛋白的表达作了检测，结果发现15例(45.7%)P16蛋白表达阴性。分化低癌组织P16蛋白缺失率显著高于分化高者(P<0.01)，且P16表达缺失的患者生存期明显短于有P16表达者(P<0.05)，提示P16蛋白表达的缺失可能与HCC的发生、发展及预后有关。
　　关键词　P16INK4/MTSI　肝细胞性肝癌

Clinical Significance of Loss of P16 Expression in
Human Primary Hepatocellura Carcinoma

Huang Jianzbao,Shen Wenlu,Li Bo,Luo yigang
Dept.of General Surgery,The Southwest Hospital of the Third Military Medical Vniversity 400038
Cheng Niang
Dept.of patholog,The first Affiliated Hospital of West China Medical Vniversify 610041

Abstract p16 expression was determined by immunohistochemical analysis on 35 paraffin specimens of primary hepatocellular carcinoma(HCC)that were curatively resected.Fifteen of 35 HCC spencimen specimens (45.7%)showed negative p16 expression.The rate of negative p16 expression was significantly higher in the poor differentiated HCC than in the differentiated HCC(P<0.01).Morever,patients with negative p16 epression survived for a significantly shorter period of time than those with positive p16 expression(P>0.05).The results suggest that loss of p16 expression may be relevant to the development and prognosis of hepatocellular carcinoma.
Keywords P16INK4/MTSI Hepatocellular carcinoma immunohistochemial analysis

　　P16蛋白是P16基因的编码蛋白，在细胞周期起负性调节作用，P16蛋白功能的丧失与细胞过度增生以至癌变有关。
　　我们对35例原发性肝细胞性肝癌标本、相应的癌旁组织P16蛋白表达情况及其与临床特征的关系作了研究，现报道如下。
对象和方法
1　对象：35例原发性肝细胞性肝癌(HCC)标本及其相应的癌旁组织均为华西医科大学普外科1995年4月～1996年9月手术切除标本。男性29例，女性6例。年龄26～70岁，平均49±14.3岁。病理分级，Ⅰ级3例，Ⅱ级17例，Ⅲ级11例，Ⅳ级4例。31例作了血清乙肝表面抗原标记HBsAg检测，其中HBsAg阳性者20例。术后随访1.5～2.5年，平均2.2年。所有标本均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4μm切片。
2　方法：免疫组化染色采用链菌素亲生物素——过氧化物酶法，即SP法。第一抗体为兔抗人P16多克隆抗体C-20(美国santa-cruz公司)，稀释度1∶50，第二抗体为生物素化羊抗兔1gG，稀释度1∶100，二抗及辣根过氧化物酶标记链菌亲和素由美国Zymed公司生产的SP试剂盒提供，具体操作按药盒说明书进行。阴性对照以PBS代替一抗，阳性对照用已知的P16阳性的乳癌组织。
　　结果判断：显微镜下10%以上的细胞呈清晰棕色判为P16蛋白阳性。
　　结果统计：采用χ2检验进行统计学处理。

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