|
幽门螺杆菌相关性胃疾病患者末梢血中Hp |
| |
及病理组织学检查证实,其中,慢性浅表性胃炎(CSG)32例,慢性萎缩性胃炎(CAG)42例,十二指肠球部溃疡(DU)38例,胃溃疡(GU)36例,胃癌(GCa)20例,共计168例。其中男性96例,女性72例,年龄最大76岁,最小17岁。全部病例均在距幽门口5cm左右胃窦小弯侧同一部位连续取两块胃粘膜组织,分别做组织学检查、快速尿素酶试验和PCR检测。Hp-PCR检测试剂及斑点金免疫渗滤试剂盒由第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所提供。快速尿素酶试剂由珠海克隆科技有限公司提供。胃镜检查用欧林巴斯100型电子胃镜进行。
二、方法:(1)胃粘膜组织Hp的常规检查:在同一部位取两块组织,一块用10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋,切片,行HE染色做出病理诊断,并采用Warthin-Starry染色,另一块组织作尿素酶试验及Hp-PCR检测。尿素酶试验、PCR检测及Warthin-Starry染色中任两项阳性者判为有Hp感染［4］。(2)末梢血中Hp-CagAIgG检测:①原理:将待检血清加于预先包被有CagA的微孔滤膜上,将羊抗人IgG结合于胶体金颗粒表面,若血清中含有IgG抗CagA抗体,便形成CagA-IgG-抗IgG,在膜上形成肉眼可见的红色斑点。②步骤:采用Hp阳性患者末梢血30μl加入稀释液1ml内待用;在斑点金免疫渗滤板膜中央加洗涤液一滴,待渗入;将待检血10μl逐滴加于膜中央,待渗入后加洗涤液3滴;将胶体金标记物15μl,逐滴加于膜中央,待渗入后,再加洗涤液3滴;③结果判定:在膜中央出现红色斑点为阳性。
结果
DIGFA对Hp阳性胃病患者末梢血中Hp-CagAIG的检测结果,见附表。
附表 Hp阳性胃病患者末梢血Hp-CagAIgG检出结果
类别 Hp阳性例数 Hp-CagAIgG阳性例数 检出率(%)
CSG 32 21 65.63
CAG 42 33 78.57
DU 38 36 94.74
GU 36 33 91.67
GCa 20 19 95.00
总计 168 142 84.52
讨论
目前诊断Hp感染的方法主要有侵入性和非侵入性两大类。前者包括组织病理学检查、尿素酶试验、细菌培养及PCR技术;后者包括尿素酶呼吸试验及ELISA法检测抗体。侵入性检查虽然直观,但费时,患者痛苦大;尿素酶呼吸试验费用昂贵,而ELISA法也存在操作复杂等不足。本研究中,尿素酶试验采用PH的改变,间接判定结果,受外界影响大,若Hp量少,不足以引起PH的改变,就会出现假阴性;W-S银染色与切片的厚度、染色的均匀程度、细菌数量的多少有密切关系,而且仅从细菌形态上进行判断,也容易出现假阳性及假阴性;PCR技术操作要求条件高,易污染,稍有不当也可能出现假阳性。本研究采用DIGFA检测Hp-CagAIgG。该方法是近年来发展起来的免疫检测新技术,其微孔膜既能吸附蛋白质,又具有快速渗滤及毛细管作用,当血清标本通过微孔膜时血清中抗体不仅能与膜上的抗原相结合,还能浓集于膜上而加快免疫反应,且胶体金标记物为红色,结合后即显红色斑点,不需加入其它试剂显示。该方法除具有ELISA法之特异、敏感等特点外,另一显著特点是快速、简便,一般可在2～3分钟内出结果,可以单人份或多人份操作,不需特殊设备,可检测血清,也可检测末梢血,为大面积、大样本的CagA阳性Hp的筛选提供快速、廉价、易普及的检测方法,对了解我国人群中CagA阳性Hp感染状况,指导CagA阳性Hp感染的诊断及治疗提供方便条件。
本研究采用斑点金免疫渗滤试验检测Hp阳性胃病患者末梢血Hp-CagAIgG,结果显示,CSG中Hp-CagAIgG为65.63%,CAG为78.57%,DU为94.74%,GU为91.67%,GCa为95%,胃及十二指肠球部溃疡和胃癌组织中CagA阳性Hp感染率显著高于胃炎组,这与文献［2,3,5］报道结果相一致。这一结果提示,DIGFA快速检测Hp-CagAIgG快速检测方法的建立,将为CagA阳性Hp感染的流行病学研究及Hp-CagA与胃、十二指肠疾病关系的研究提供重要条件。
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 苯那普利对高血压左室肥厚与QTc离散度的影响
下一个医学论文： 微量14C
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文