Fas可能是雷公藤红素诱导HMC

鲍一笑　张玲珍　李　莉　张登海　孔宪涛

　　中国图书分类号　R392.12　R285.5
　　摘　要　目的：探讨雷公藤红素对HMC-1细胞表达Fas、Fas-L的影响及与凋亡的关系。方法：用流式细胞仪检测细胞凋亡和Fas、Fas-L的表达。结果：HMC-1细胞能自发表达Fas，不表达Fas-L。经雷公藤红素作用，Fas呈先升后降的变化，Fas-L低水平表达。Fas阳性率下降与凋亡率增加相关。结论：Fas可能是雷公藤红素诱导HMC-1细胞凋亡的途径之一。
　　关键词　雷公藤红素　HMC-1细胞　Fas　Fas-L　凋亡

Fas may be one of the molecules which mediates HMC-1 cell apoptosis induced by tripterine

BAO Yi-Xiao,ZHANG Ling-Zhen,LI Li et al.
Clinical Immunology Center of PLA,Changzheng Hospital,the Second Military Medical University ,
Shanghai 200003

　　Abstract　Objective:This paper reports the effect of tripterine on the expression Fas and Fas-L in HMC-1 cells and the relation to apoptosis.Methods:The expression of Fas/Fas-L and apoptosis were assayed by flow cytometry.Results:HMC-1 cells constituantly express Fas(22.7%),but not Fas-L.On exposure to tripterine at the concentration of 1.0 μmol/L,Fas positive rate increased to 57.5% at 2 h,then decreased to 12.5% at 4 h and 2.3% at 6 h.Fas-L expressed at lower level.There were significant relation between the decrease of Fas positive rate and increase apoptosis.Conclusion:Fas is one of the molecules which mediates HMC-1 cell apoptosis induced by tripterine.
　　Key words　Tripterine　HMC-1 cell　Fas　Fas-L Apoptosis

　　雷公藤红素是雷公藤单体之一，属三萜类色素［1］ 。它能诱导人肥大细胞系HMC-1细胞凋亡［2］，但诱导凋亡的机制尚不清楚［3］。 Fas抗原（CD95）是一种膜受体，属TNFR/NGFR家族成员，表达于多种类型的细胞表面，其配体（Fas ligand ,Fas-L)主要表达于活化的淋巴细胞。Fas与Fas L结合能迅速地启动细胞凋亡。 本文研究雷公藤红素诱导HMC-1细胞凋亡过程中Fas 及Fas-L表达的变化及与凋亡的关系，以探讨雷公藤红素诱导HMC-1细胞凋亡的机制。

1　材料与方法
1.1　细胞培养　HMC-1细胞培养于5％CO2 , 37℃孵箱中。培养基IMDM(GIBCOBRL )含10% 热灭活小牛血清，0.1 U/L青霉素，0.1 U/L 链霉素。培养细胞密度为0.5×106～1.0×106 ml-1,取对数生长期细胞待用。
1.2　细胞凋亡的检测
1.2.1　形态观察　HMC-1细胞呈圆或椭圆形。凋亡时细胞膜内陷，核浓缩，形成凋亡小体。
1.2.2　流式细胞仪(FCM) DNA含量分析　1×106个细胞加50 μl含0.1% Triton-X100 的碘化丙啶(PI) (5 μg/ml) 染色，避光放置5 min,加0.5 ml PBS, 上流式细胞仪检测,Multicycles软件分析结果。
1.2.3　DNA琼脂糖电泳　1×106细胞加100 μl TBE缓冲液， 0.25% NP-40, 0

[1] [2] 下一页