中华鳖MHC I 2链基因克隆及序列分析

夏　春　

　　中国图书分类号　R392.13
　　摘　要　目的：为了探明中华鳖MHC的结构与功能和寻找该种群的分子标记，对中华鳖MHC class I α2基因中由两个半胱氨酸形成二硫键的区域进行了克隆和序列分析。方法：根据人和动物的MHC Ia α2链中两个半胱氨酸侧翼的保守序列设计了混合型引物，采用PCR法从中华鳖基因组DNA中克隆了MHC I α2链(Trsi-BX1)。结果：经氨基酸序列的同源性分析，Trsi-BX1存在抗原多肽结合位点(T-143、K-146、W-147、Y-159)以及β2微球蛋白结合位点(Q-115、A-117、D-119、G-120、D-122)，并与人和动物的MHC Ia α2存在41.1%～63.9%同源性。结论：Trsi-BX1属MHC class Ia类基因，可作为中华鳖种群的分子标记。
　　关键词　中华鳖　MHC I　分子标记

Molecular cloning and sequencing analysis of MHC class I alpha 2 domain from soft-shelled turtle(Trinyx sinensis)

XIA Chun.
Department of Microbiology and Infection,College of Veterinary Medicine,Chinese Agricultural University,Beijing 100094

　　Abstract　Objective:In order to research the MHC in soft-shelled turtle and looking for a specific marker in vertebrate.Methods:The MHC class I α2 domain clone(Trsi-BX1)was isolated from soft-shelled turtle by PCR using mixed primers based on two highly conserved amino acid(aa)sequence blocks surrounding two cysteine residues in the second domain of MHC class Ia α2 chains of humans,mice,chickens and lizard.The aa sequence similarities between Salmo salar and Xenopus,and lizard,mouse and human.Results:The data indicate that four residues into the antigenic recognition site(T-143、K-146、W-147、Y-159)are conserved,and the β2-microglobulin binding sites (Q-115、A-117、D-119、G-120、D-122) are also conserved in the Trsi-BX1.Conclusion:The Trsi-BX1 is part of the MHC class Ia and may identified in vertebrate using specific marker.
　　Key words　Soft-shelled turtle　MHC class I　Specific marker　

　　主要组织相容性复合体(MHC)分为Class I、Class II和Class III，在识别自我和非自我的免疫应答中起着十分重要的作用。其中，MHC I分子的主要功能是与病毒等内源性蛋白多肽结合并向CD8阳性细胞提呈、活化细胞毒T细胞；并促进B细胞分泌抗体［1］ 。至今，人、鼠MHC I分子的结构与功能已研究得相当清楚，而低等脊椎动物MHC I的研究尚处于起步阶段。Guillemot等1988年克隆了鸡MHC I基因［2］。Hashimoto等克隆了鲤鱼MHC I基因［3］，Flejinik等克隆了蛙MHC I基因。这些报道证明了低等脊椎动物的MHC I基因与人类有着20%～35%的同源性，也是由α1、α2、α3、膜通透和细胞质领域5个功能区

[1] [2] 下一页