张仙鹤 王 晶 牛战琴 张开明
中国图书分类号 R711.32 R392.12
摘 要 目的:探讨IL-8与宫颈炎症的关系。方法:采用RT-PCR法对糜烂及正常宫颈的脱落细胞和血清IL-8进行测定。结果:发现患者与正常人的宫颈脱落细胞IL-8扩增后均为阳性,经模板稀释后患者阳性率为73%,正常为21%,差别显著,但血清IL-8测定无明显差异。结论:认为IL-8在宫颈炎症中起重要作用。
关键词 宫颈糜烂 IL-8 基因扩增术
Semiquanitatilly study of IL-8 gene expression in exfoliative cells of cervical erosion
ZHANG Xian-He,WANG Jing,NIU Zhan-Qin et al.
Department of Obstetrics and Gynecology,the First Hospital,Shanxi Medical University,Taiyuan 030001
Abstract Objective:To investigate the relationships between IL-8 level and cervical erosion.Methods:RT-PCR was used to study the difference of IL-8 gene expression in cervical exfoliative cells and in sera from patients with cervical erosion and normals.Results:After template dilution,positive IL-8 gene expression in exfoliative cells of patients with cervical erosion was 73% and normal controls 21%,the difference is significant.But there is no difference of IL-8 levels in sera from both groups.Conclusion:IL-8 is significant in the cervical erosion.
Key words Cervical erosion IL-8 Gene proliferation
已发现正常及病理状态下的宫颈组织中均含有大量的中性粒细胞,IL-8对其具有强烈的趋化及激活作用,为了解IL-8在有炎症的宫颈及正常的宫颈细胞表达有无差异、我们采用模板稀释RT-PCR法对22例宫颈糜烂患者及24例正常人的宫颈脱落细胞进行了IL-8半定量研究,同时对血清中IL-8含量进行了测定。
1 材料与方法
1.1 检查对象 病例取自1995年8月至1996年2月山西医科大学一院妇产科门诊及住院患者共22例。年龄23~54岁,平均34岁。宫颈糜烂Ⅰ度6例、Ⅱ度9例、Ⅲ度7例。病期短则1月,长则1年。主诉白带量多者11例。血性白带者5例、接触出血者4例、下腹痛者2例。取材用0.5 cm宽竹刮板,在窥阴器暴露宫颈,发现糜烂部位后轻轻刮取,将刮取物置于盛有500 μl中性缓冲甲醛液的离心管中摇动数次,使所取标本充分沉入管中,离心备用。对照组为无明显宫颈糜烂的正常体检者24例,其中22例为与同患者一起扩增时选择的配对正常人,年龄与配对患者相差不超过5岁。
1.2 主要试剂及设备 血清IL-8检测试剂盒(购自美国Genzyme公司)、酶标仪(芬兰Labsystems)、IL-8 引物(为Zymed公司产品,引物序列从5′端至3′端为ATGACTTCCAACCTGGCCGTG和TTATGAATTCTCAGCCCTCTTCAAAAACTTCTC)、AMV反转录酶、Taq酶、RNasin(为Promega公司产品)、dNTP(Sigma产品)、琼脂糖(国产)、基因扩增仪(美国MJ-PTC-100扩增仪)。
1.3 方法 血清IL-8测定采用多抗ELISA法,主要步骤为IL-8单克隆抗体包被板,加待测血清,洗板后再依次加入抗IL-8多抗,辣根过氧化酶标记二抗及底物液,最后用终止液,酶标仪450 nm及650 nm(双波长法)处,测光度A值,最后由标准曲线求得IL-8含量(单位pg/ml)。
基因扩增法采用R
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