倍数为26,腹水样品为212。
1.2.2 检测方法 本实验采用军事医学科学院基础医学研究所建立的IL-6生物活性MTT[3-(4.5-dimethtchiazo/z-yl)-2.5-diphenyltetrazo/iambromide]比色测定法[3]。测定采用7TD1细胞株,此细胞需IL-6存在的情况下才能生长和增殖,且增殖程度与IL-6的浓度在一定范围内密切相关。常规条件下培养1 w,一般传12代,RPMI1640培养液洗涤细胞3次,离心2 000 r/min 10 min,RPMI1640调细胞浓度为1.2×105 ml-1。置96孔培养板上进行细胞培养,每孔分别加各种稀释浓度的样品50 μl及调好细胞数的7TD1细胞50 μl,常规条件培养48 h,加入MTT液20 μl,再培养48 h,而后加入10%SDS 100 μl/孔,37℃放置过夜,在酶联测定仪上测定A-600值,以空白对照管调零点。
1.3 统计方法 IL-6活性计算采用能引起50%最大生长刺激样孔,测定值定为IL-6浓度为1 U/ml推算所测定样品IL-6值。测定结果经t检验进行显著性分析。
2 结果
2.1 卵巢癌患者腹水中IL-6水平为1 942.26±376.51 U/ml,血清中IL-6水平为20.95±4.06 U/ml,两组比较差异显著(P<0.0001)。
2.2 卵巢癌患者腹水、血清中IL-6水平随分期的增加而升高,与卵巢癌分期呈正相关。Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ期、Ⅰ~Ⅱ期与Ⅳ期、Ⅲ期与Ⅳ期间腹水中IL-6水平相比较差异显著(P<0.005),结果见表1。
表1 卵巢癌患者不同病程腹水、血清中IL-6水平比较(±s,U/ml)
Tab.1 Comparison of IL-6 levels of ascites & serum in the stages of ovarian carcinoma patients(±s,U/ml)
Stage n Levels of IL-6 in ascites Levels of IL-6 in serum
Ⅰ~Ⅱ 16 1 064.27±375.311) 11.97±4.972)
Ⅲ 14 1 894.41±342.411) 23.95±3.872)
Ⅳ 10 2 868.05±392.251) 33.22±3.202)
Note:1)Compared among the three groups,P<0.005;2)Compared among the three groups,P<0.005
2.3 卵巢癌患者术后IL-6水平与肿瘤残留大小呈正相关,无残留与残留<2 cm、无残留与残留>2 cm、残留<2 cm与残留>2 cm等中的腹水、血清中IL-6水平相比较差异显著(P<0.05),见表2。
表2 卵巢癌患者肿瘤术后残留与腹水、血清IL-6水平的变化(±s,U/ml)
Tab.2 Comparison of IL-6 levels of ascites & serum in the residues of ovarian carcinoma after the operations (±s,U/ml)
Residue(cm) n Levels of IL-6 in ascites Levels of IL-6 in serum
0 14 275.46±199.421) 10.48±4.752)
<2 7 1 533.09±478.401) 20.70±4.082)
>2 19 2 667.83±452.501) 31.69±3.752)
Note:1)Compared among the three groups,P<0.005;2)Compared among the three groups,P<0.005
3 讨论
3.1 卵巢癌腹水、血清中IL-6测定的临床意义 卵巢癌是诊断晚、转移早的肿瘤,临床上卵巢癌患者多发生盆腔转移,且出现腹水者多,大量腹水造成患者低蛋白血症,抵
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