低密度脂蛋白亚组分氧化易感性的检测及临床应用

汪俊军　刘小传　庄一义

摘要　建立低密度脂蛋白(LDL)氧化产物共轭双烯(CD)检测法，对反应条件进行选择，并初步应用于临床。根据LDL氧化产生的CD量随时间变化绘制氧化曲线，观察延滞时间，CD最大生成率及总CD值。资料表明：冠心病患者B型LDL亚组分较A型延滞时间明显缩短；总氧化值亦显著升高。认为冠心病患者B型LDL较A型易于氧化，且氧化程度增高，促进动脉粥样硬化的发生。低密度脂蛋白氧化易感性的检测对了解LDL的氧化过程和防治心脑血管疾病有参考价值。
关键词　低密度脂蛋白；亚组分；共轭双烯；冠心病

Susceptibility of low density lipoprotein subfractions to in vitro oxidation and its application

WANG Junjun，LIU Xiaozhuan,ZHUANG Yiyi
(Center of Medical Laboratory Science of PLA,Nanjing General Hospital of Nanjing Command,Nanjing　210002)

Abstract　In this paper,the continuous monitoring of LDL oxidation by absorbance measurements at 234 nm was used to analyze the susceptibility of LDL and its subfractions to Cu2+-mediated oxidation in patients with coronary artery diseases(CAD).The data showed that a shorter lag time of dense pattern B LDL subfraction(66.5±27.0 vs，85.5±41.5 min,P<0.05)than that of light pattern A LDL subfraction in patients with CAD,and an increase in total amout of conjugated dienes(178.3±87.8 vs，115.9±39.3 nmol CD/mg LDL,P<0.01)were also observed,while the maximal rate of oxidation had no difference in two LDL subfractions.It is indicated that the susceptibilty to in vitro oxidation of the dense LDL in CAD patients was enhanced.
Key words　LDL subfractions；conjugated dienes；coronary artery diseases

　　氧化低密度脂蛋白(LDL)在动脉粥样硬化(As)形成中起着重要作用，氧化修饰LDL易被清道夫受体识别和摄取，导致细胞内胆固醇酯的蓄积，促进泡沫细胞的形成，参与As的发生。根据LDL颗粒的大小、密度不同，分成A型(大而轻的)和B型(小而重的)两个亚组分，以B型为主的LDL是As发生的强危险因素［1］。目前LDL的氧化易感性检测倍受国内外学者关注，冠心病(CHD)患者LDL氧化易感性同As发生程度相关［2］，而CHD患者LDL亚组分A、B型间氧化易感性差异未见文献报道。本文建立了体外LDL氧化产物共轭双烯(CD)检测法［4］；并对CHD患者LDL不同亚组分的氧化易感性进行分析，以探讨B型LDL致As作用的机制。

1　材料和方法
1.1　实验对象　冠心病(CHD)患者均为男性心肌梗塞存活者，年龄50～65岁，18例。收集空腹血浆(含EDTA-Na2 1 mg/ml)。
1.2　设备及试剂　超速离心机(Beckman L8-80 M)；UV-300型紫外分光光度计(岛津)；CuSO4分析纯；pH 7.4　0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)。
1.3　方法
1.3.1　脂蛋白的制备［3］　两次序列超速离心提取血浆LDL(密度为1.025～1.055 g/ml);然后将LDL密度调为1.042 g/ml超离，上部为A型LDL(密度为1

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