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试用ICAM |
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张 明 杨贵贞
摘 要 目的：探讨ICAM-1相关肽抑制角朊细胞将超抗原TSST-1递呈给T淋巴细胞。方法：应用鼠抗人CD54单克隆抗体筛选噬菌体随机十五肽库，经4轮筛选后，挑取20个克隆进行测序，利用含保守序列的阳性克隆噬菌体对角朊细胞递呈超抗原TSST-1给T细胞进行阻断试验。结果：得到保守序列为ITRSFQSSMEPGPPG，所筛选的阳性噬菌体克隆与野生型噬菌体相比具有明显的阻断效应(P＜0.01)。结论：ICAM-1相关小分子肽可望降低超抗原介导的皮肤炎症反应。
关键词 噬菌体展示技术 细胞间粘附分子-1 超抗原 中毒性休克综合征毒素-1 角朊细胞
中国图书号分类号 Q7 R392.12
Inhibiting the co-stimulating effect of keratinocyte using ICAM-1 related peptide
ZHANG Ming,YANG Gui-Zhen.
Department of Immunology,Norman Bethune University of
Medical Sciences,Changchun 130021
Abstract Objective:To explore the inhibiting effect of ICAM-1 related sequences peptide on keratinocytes which present superantigen TSST-1 to T cells.Methods:Used mouse anti-human CD54 McAb to screen phage display 15-mer peptide random library.After 4 round selections chose 20 clones at random and analyzed the DNA sequences.Used the phage contained conservative sequences to block that keratinocytes present superantigen TSST-1 to T cells.Results:The conservative amino acid sequence is ITRSFQSSMEPGPPG.The blocking effect of positive colonal phage is significantly stronger compared with that of wild type phage(P＜0.01).Conclusion:ICAM-1 related small peptide could reduce skin inflammation mediated by superantigens.
Key words Phage display Superantigen Intercellular adhesion molecule-1 Toxic Shock syndrome toxin-1 Keratinocytes
细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是一种表达于多种细胞表面的跨膜糖蛋白，是最早发现的免疫球蛋白的超家族粘附分子之一。通过与其相应的配体整合素家族成员之一的LFA-1相互作用，在介导细胞的信号转导与活化、炎症反应及创伤愈合等一系列重要的生理和病理过程中发挥重要作用［1］。正常情况下，人表皮角朊细胞(keratinocytes，KC)不表达ICAM-1，但在许多炎症性皮肤病病损处，KC可表达ICAM-1［2］，体外试验表明，经IFN-γ处理培养中的人类KC可表达MHC Ⅱ类分子及ICAM-1［3，4］；免疫组化研究表明表达ICAM-1r KCgn LFA-1阳性T细胞可同时集中于某一部位，表明ICAM-1在皮肤炎症过程中发挥着重要作用。因此，寻找一种ICAM-1的拮抗物来阻断ICAM-1-LFA-1介导的细胞粘附将有助于缓解炎症反应的发生。本文应用噬菌体展示技术(Phage display)钓取ICAM-1的相关序列并对其在KC辅助超抗原介导的T细胞增殖中的封闭效应进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料 K91菌株，野生型噬菌体Fusel，测序引物均为美国密苏里大学S[1] [2] 下一页
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