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肥大细胞与肺成纤维细胞共育的形态学观察 |
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常规制成两个Epon包
埋块，每个包埋块超薄切片制成两个铜网样品(每瓶细胞制成4个铜网样品，每组8瓶细
胞共32个铜网样品)，H-600透射电镜观察并摄片。
5.3扫描电镜：共育组和对照组各取5张载有贴壁细胞的盖玻片常规扫描电镜制样，
S-100扫描电镜观察、摄片。
5.4 LFb 定量分析：(1)单位面积LFb 计数：每组各取10张HE染色的盖玻片培养细
胞，光镜下随机取每张染片5个低倍视野(×100，单位面积为0.196mm2)，用图像分析仪
(PC Vision Plus85型)进行细胞计数。10张染片共50个视野的细胞均数()作为该组单
位面积细胞数。(2)粗面内质网(RER)的定量分析：透射电镜下每个铜网样品随机拍取4
个LFb(×15 000)，两组各取120LFb输入图像分析仪，计量分析 LFb 的体密度(Vv)、面
密度(Sv)和平均截面积()。
实验结果以表示，组间比较采用t检验。
结 果
1.光镜
倒置显微镜观察发现，共育组第1～2d LFb 呈单层生长，第3d开始逐渐呈多层交错
重叠生长。对照组实验全程均呈单层生长。盖玻片细胞HE染色，共育组 LFb 第5d亦呈
多层交错重叠生长，有丝分裂像多见。对照组呈单层生长，有极性，有丝分裂像少(图
1a,b)。甲苯胺蓝染色可见LFb表面和细胞间散在PMC，染成紫红色(异染性)。一些PMC
质膜完整，细胞内颗粒较稀疏清晰(图2)，细胞周围(胞膜外)有数量不等的异染颗粒。
2.透射电镜
共育组与对照组LFb形态基本相同。细胞呈梭形或星形，核多为卵圆形，或有凹
陷，1～3个核仁，胞质含丰富的RER，部分RER 扩张，甚至呈池状，其内容物为均匀
低电子密度，呈细颗粒状(图3)。对照组LFb形态与共育组LFb相似。
未经培养的PMC呈圆形或卵圆形，表面有丝状微绒毛，胞质充满分泌颗粒，颗粒圆
形，表面为颗粒界膜(perigranular membrance)包被，内为电子密度高的均质或细颗粒状
的致密物(图4)。与LFb共育的PMC形态与培养前大致相同，只是部分细胞表现出明显的
脱颗粒现象，颗粒内致密物电子密度降低，颗粒界膜相互融合，似形成排放颗粒内容物
的“管道”(图5)。
3.扫描电镜
多数 PMC 为圆形或椭圆形，表面为典型的片状伪足(lamellipodia)。部分细胞形态
比较特殊，呈橄榄形或贝壳形，细胞表面为“桑椹样”(mulberry-like)，细胞周围散在
大小不一，数量不等的颗粒样物质(图6)。有的细胞表面可见少量小“孔洞”，可能是
胞吐后遗留的痕迹。未经培养的 PMC 呈圆形，表面有片层状伪足，周围无颗粒。LFb
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