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小白鼠甲状腺滤泡上皮细胞发育的组织化学与立体计量学研究 |
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于新宇 孙长滨 王士平*
(大连大学医学院组织学胚胎学教研室，大连116622；*新疆医学院组织学胚胎学教研室)
摘 要 对BALB/c小白鼠甲状腺滤泡上皮细胞从胚胎14d(E14d)至成年期的发育过
程，进行了组织化学与立体计量学研究。结果表明：(1)E14d～15d，细胞排列成不规
则的团和索状。E16d～E17d，细胞围成原始的甲状腺滤泡。E18d，滤泡腔内出现PAS
反应阳性胶体，成熟的甲状腺滤泡结构基本形成。(2)胚胎期滤泡上皮细胞核较大，
核/质比大于1.0，分裂像易见。出生后21d，核/质比稳定在0.35，滤泡上皮细胞形态结
构接近成年期状态。(3)E16d,AcP、ATPase、MAO 和SDH 均呈阳性反应，随后酶活性
逐步增强，至生后21d均达强阳性反应。
关键词 甲状腺滤泡上皮细胞 发育 组织化学 立体计量学 小白鼠
有关甲状腺发生、发育和分化的研究，国内外已有不少文献报道[1～4]，但关于甲
状腺滤泡上皮细胞的系统发育规律未见介绍。本研究的目的是观察小白鼠甲状腺滤泡
上皮细胞从胚胎期至成年各个发育阶段的变化，结合立体计量学和组织化学技术，探
讨其发育分化的规律。
材料和方法
选取60只健康的成年BALB/c小白鼠，雌雄各半，分别进行交配，以雌鼠出现阴栓
时作为胚胎0d。于胚胎第14、15、16、17、18、19d分别取其颈胸段；生后第1、7、
14、21、28d及成年(生后3个月)取其颈段，各期均取8例。所取材料分别制作石蜡切片
和冰冻切片。
1.石蜡包埋切片
1.1 苏木精-伊红(HE)染色：10%福尔马林固定，连续切片(厚5μm)，观察细胞形
态结构，选取E14d\,E16d\,E18d,生后1、7、14、21、28d及成年期的连续切片各5张，
油镜下摄片，照片放大8倍。每张照片上随机选取10个细胞，用测试方格点计数法[5]
分别计数胞核落点数(胞核体密度)和胞质落点数(胞质体密度)，并计算出每个时期胞
核体密度、胞质体密度均数值及核/质比值。对各期测量结果进行方差分析。
1.2 PAS反应：Carnoy液(4℃)固定，连续切片(厚5μm)，McManus法染色[6]，观
察胶体和胶体小滴。对照采用淀粉酶消化法以区分细胞质内胶体小滴和糖原。
2.恒冷箱冰冻切片
所取材料不经固定，直接放入美国产AO型恒冷箱冰冻切片机内(-30℃)，做连续切
片(厚8μm)，分别进行下列4种酶组织化学染色：偶氮偶联法显示酸性磷酸酶(AcP)，对
照采用氟化钠抑制；铅法显示腺苷三磷酸酶(ATPase)，对照采用去除底物孵育；四唑盐
(NBT)法显示单胺氧化酶(MAO)，对照采用安非它明(amphetamine)抑制；四唑盐(NBT)
法显示琥珀酸脱氢酶(SDH)，对照采用去除底物孵育。上述各种酶染色方法见文献[6]。
结 果
1.形态学观察
E14d，甲状腺由不规则排列的细胞团、索组成，细胞呈圆形或多边形，胞核较大，
核仁清楚，异染色质较少，分布于核膜内表面，分裂像易见(图1)。E15d，细胞排列成
不规则团状，分裂像易见(图2)，细胞形态结构与E14d相似。E16d，腺体外侧部出现由
细胞围成的原始滤泡，这种滤泡体积较大，呈球形，滤泡腔内含有嗜中性致密物质，
但未见胶体出现。滤泡上皮细胞呈圆形或卵圆形，胞核较大，分裂像易见(图3)。E17d，
腺体中央也出现原始滤泡。E18d，滤泡结构遍布整个腺体，滤泡腔中出现均质状胶体，
HE染色呈淡粉红色；滤泡上皮细胞呈单层立方形，核较大，圆形，位于中央，异染色
质致密呈块状分布于核膜内表面，分裂像少见(图4)。出生后，滤泡体积增大，滤泡腔
内胶体增多，嗜酸性染色增强。生后21d(图5)。滤泡上皮细胞形态结构接近成年期状
态。
2.立体计量学分析
从表1可见，从E14d至生后21d，胞核体密度呈下降趋势，胞质体密度呈上升趋势，
核质比逐渐减小。(1)胚胎期胞核、胞质体密[1] [2] 下一页
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