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脑脊液肿瘤坏死因子测定在中枢神经系统白血病的临床意义 |
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is factor-α Central nervous system leukemia
中枢神经系统白血病（CNSL）是急性白血病常见并发症之一，严重影响白血病患者的预后。据研究在光学显微镜下每微升CSF中能发现一个白血病细胞，那么CSF中就存在105个白血病细胞［1］。此时对CNSL已失去早期治疗的机会。如何早期准确诊断CNSL仍是临床难点之一。国外有人报道测定儿童CNSL患者CSF-TNF-α的含量有重要的临床意义［2］，对此国内研究很少。我们测定了急性白血病患者CSF-TNF-α含量，目的在于探讨其对早期诊断CNSL的意义。
1 材料与方法
1.1 对象 急性白血病40例，根据国内1983年CNSL诊断标准［3］，分为CNSL组和无CNSL组。CNSL组10例，男6例，女4例，儿童和成人各5例;年龄4～58岁，中位数20岁。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）7例，急性非淋巴细胞白血病（ANLL）3例（M2、M3、M4各1例）。无CNSL组30例，男20例，女10例，年龄2～12岁，中位数6.5岁;其中ALL 22例，ANLL 8例。对照组15例，儿童10例，成人5例，年龄3～46岁，中位数9岁，为头痛、头晕的非白血病患者，排除了CNS器质性病变，脑脊液无色透明，常规、生化指标均正常。
1.2 方法 急性白血病及CNSL患者鞘注化疗前测CSF-TNF-α，部分患者在治疗中做动态观察。腰椎穿刺取CSF 0.5～1.0 ml，凡因穿刺损伤致血液进入CSF的标本均剔除不列入观察。CSF采集后离心，装于灭菌试管中，加橡皮塞密封，置于-20℃保存。采集CSF同时测常规、生化。除对照组外，均采用自然沉降法找白血病细胞。CSF-TNF-α测定：①试剂:缓冲剂、抗TNF-α血清、125I-TNF、PR分离剂、标准品（解放军总医院东亚免疫技术研究所提供）。②主要仪器：125IFT-646A微单头放免仪（北京核仪器厂生产），LDR4-8.4低温离心机（北京医用离心机厂生产）。③测定方法：程序如下：将2×75 mm洁净塑料管编号备用。空白管、最高结合管分别加入缓冲液200和100 μl，标准管分别加入各种浓度（24.3，8.1，2.7，0.9，0.3 ng/ml）的标准品100 μl，样品管加入待测样品100 μl，除空白管外各管加入抗TNF-α血清100 μl，充分混匀，4℃放置24 h，各管加入分离剂1 ml后充分混合均匀，室温放置20 min，离心3 500 r/min 15 min，弃上清液，在自动γ计数器上测放射性强度。④结果计算:按自动γ计数器RIA程序得出样品中的TNF-α浓度。
1.3 统计学处理 测定数据采用方差分析，应用SBAS统计分析软件在微机上进行处理。
2 结果
2.1 各组CSF-TNF-α含量合并分析 无CNSL组CSF-TNF-α均值与对照组比较无显著性差异（P＞0.05）。CNSL组CSF-TNF-α均值高于无CNSL组和对照组，与两组比较均有极显著性差异（P＜0.01），各组CSF-TNF-α含量性别和年龄无明显差异(见表1)。
2.2 阳性率和动态观察 本文取对照组80％单侧上界为诊断标准，测算结果CSF-TNF-α诊断标准为0.44 ng/ml，超过诊断标准的定为阳性。CNSL组10例患者CSF-TNF-α含量阳性率均为100％。无CNSL组30例患者有7例阳性，两组精确检验P＜0.001，差异有极显著性意义。无CNSL组7例阳性患者随访80 d有5例确诊为CNSL，提示在确诊CNSL前CNS已受到白血病细胞浸润。这5例患者CSF-TNF-α含量确诊时较确诊前进一步增高，平均增加0.12 ng/ml。CNSL组10例患者在治疗过程中随访观察CSF-TNF-α含量，9例治疗后临床症状缓解，CSF常规、生化恢复正常，CSF中白血病细胞消失，复查CSF-TNF-α含量，有8例明显下降，但仍高于无CNSL组（见图1）；另1例下降不明显，此例患者半月后CNSL复发。其余1例患者治疗过程中病情恶化，复查CSF-TNF-α含量反较治疗前升高。
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