|
低浓度H2O2对肺微血管内皮细胞的迟发效应 凋亡 |
| |
张 明 金惠铭 曹 翔 刘清行 钱睿哲 张国平
摘 要 目的和方法：对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)培养、鉴定。观察了低浓度H2O2(0～100 μM)对体外培养的PMVEC的迟发性损伤效应。结果：MTT法发现H2O2对PMVEC的增殖代谢活性具有剂量依赖性抑制作用，而且当H2O2去除后，此作用仍可进一步发展。形态观察、流式细胞仪DNA测定、3’末端标记DNA降解片断原位检测(TUNEL)均表明，细胞凋亡是H2O2对PMVEC迟发性损伤效应的一种重要形式。
主题词 内皮；过氧化氢类；肺
Delayed effect of low concentration of H2O2 on PMVEC∶apoptosis
ZHANG Ming， JIN Hui-Ming, CAO Xiang,LIU Qing-Hang,QIAN Rui-Zhe,ZHANG Guo-Ping,
Dept.of Pathophysiology,Shanghai Medical University,Shanghai(200032)
Abstract AIM and METHOD:Pulmonary microvascular endothelial cells (PMVEC) were cultured and characterized.Delayed injury effects of low concentration of H2O2(0～100 μmol/L)on the PMVECs were observed.RESULTS：It was found with MTT method that H2O2 inhibited the proliferative and metabolic activity of PMVEC in vitro in a dose-dependent way,and after the removal of H2O2，this effect could develop further.Morphological observation,flow cytometry and DNA fragment in situ detection (TUNEL) revealed that apoptosis is an important form of delayed injury effect of H2O2 on the endothelial cells.CONCLUSION：Low concentration of H2O2 could induce a delayed effect on PMVEC: apoptosis.
MeSH Endothelium;Hydrogen peroxide; Lung
肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelail cell,PMVEC)在肺的病理生理反应中起着重要作用，许多因子首先通过损伤PMVEC而引起肺的一系列病理生理变化，其中活性氧(ROS)、TNFα等在组织损伤中起的作用日益为人们所重视。活性氧包括以自由基形式存在的超氧化物自由基O(－)/(*)2，羟自由基OH·，以及不以自由基形式存在的H2O2、脂质过氧化物ROOH等。活性氧的来源众多，如吸烟、多形核白细胞或单核细胞的激活，内毒素、TNFα的损伤作用很可能也是通过ROS来实现的［1］。ROS是许多病理生理过程中的重要发病介质，如ARDS、缺血再灌注损伤等。
过氧化氢(H2O2）对内皮细胞的毒性效应早为人们所重视，但是以往的研究多着重H2O2的急性毒性效应，而对其急性作用去除后内皮细胞的迟发性改变研究较少。我们以Chen等［2］报道的方法，经改良后培养了PMVEC，观察低浓度H2O2对PMVEC增殖代谢及调亡的影响。
材料与方法
一、肺微血管内皮细胞培养及鉴定：
200 g左右的SD大鼠戊巴比妥麻醉后，无菌条件下打开胸腔，用Hanks液进行肺原位灌洗后取出肺，切取周边不含大中血管的肺组织，切成1 mm×1 mm×1.5 mm小块，种于25 cm2的塑料培养瓶(Nunc)，15～20 块／瓶。加培养液(DMEM＋20％小牛血清)少许，于体积分数为5%CO2培养箱中静置48 h，可小心添加或置换培养液少许。至60 h，弃[1] [2] 下一页
上一个医学论文： 杂色曲霉素诱导体外培养人外周血淋巴细胞凋亡的研究
下一个医学论文： 从胚胎干细胞诱导发育为浆细胞的体外实验研究
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文